DNA酶瓊脂的原理及實驗現象

  用途：用於細菌DNA酶檢測。

  原理：胰蛋白腖和大豆腖提供碳源和氮源；有脫氧核糖核酸酶的細菌分解培養基中的脫氧核糖核酸(DNA)，使DNA長鏈水解成數個單核苷酸的寡核苷酸短鏈；氯化鈣提供陽離子作為激活劑；氯化鈉維持均衡的滲透壓；瓊脂是培養基的凝固劑。將鹽酸滴在培養基表麵，如DNA酶陽性，其菌落周圍可以產生明顯透明環，如DNA酶陰性，鹽酸與完整的脫氧核糖核酸反應，可形成渾濁的沉澱；如果加入0.1%甲苯胺藍溶液，甲苯胺藍為指示劑，DNA酶陽性時，水解DNA部分為薔薇色；DNA酶陰性時，甲苯胺藍顯藍色。

  操作步驟：

  使用前，把製備好的平板放置室溫10-20分鍾。

  1、製備質控菌液。

  2、將質控菌液劃線於平板上。

  3、36±1℃倒置培養基培養18-24小時，培養結束後滴加1N鹽酸，記錄實驗結果。

  微生物試驗：

  接種以下質控菌株，36±1℃倒置培養基培養18小時：

圖1-1  DNA酶瓊脂微生物質控結果

備注：a：金黃色葡萄球菌(ATCC25923)；b：金黃色葡萄球菌(ATCC6538)；c：大腸埃希氏菌

  方法的局限性

  本培養基僅為細菌鑒定的一部分，需做其他補充試驗。

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