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慶大黴素瓊脂使用及注意事項

閆法順 林嬌嬌
錄入時間:2018-6-20 8:37:09 來源:青島betway必威西汉姆联生物

一、試驗原理:

 用於霍亂弧菌的分離培養。

 蛋白腖、牛肉膏粉提供氮源、維生素和礦物質;蔗糖提供碳源;亞硫酸鈉可刺激弧菌生長;氯化鈉維持均衡的滲透壓,既能滿足弧菌嗜鹽生長的要求,同時其形成的高滲透壓,使其他一些細菌很難生長。慶大黴素和亞碲酸鉀及較高的pH可抑製革蘭氏陽性菌和部分革蘭氏陰性雜菌;同時枸櫞酸鈉可使霍亂弧菌免受其他抑菌劑的作用。霍亂弧菌對酸性環境比較敏感,因此該pH值可增強其生長;瓊脂是培養基的凝固劑。


二、培養基配方(g/L)

蛋白腖

10.0

牛肉浸粉

3.0

亞硫酸鈉

3.0

氯化鈉

5.0

枸櫞酸鈉

10.0

蔗糖

10.0

慶大黴素

250 IU

瓊脂

15.0

pH8.3-8.7 25℃



三、實驗方法:

 1.此培養基中含有蔗糖,不宜高溫滅菌稱取本品56.0g,加熱攪拌溶解於1000mL蒸餾水中,冷至50℃左右時,加入1%亞碲酸鉀溶液0.5mL,混勻,傾入無菌平皿,備用。

 2.將質控菌液劃線接種於平板。

 3.36±1℃需氧培養18小時,記錄實驗結果。


四、結果觀察

  接種以下質控菌株,放置於36℃±1℃恒溫培養箱中需氧培養14h-18h。

質控菌株

菌株編號

生長情況

其它特征

霍亂弧菌(海水)

/

+++

菌落扁平濕潤,中心黑色,直徑2mm-3mm

非01群霍亂弧菌

/

+++

菌落扁平濕潤,中心黑色,直徑2mm-3mm

副溶血性弧菌

ATCC 17802

+/-

菌落小於1mm

糞腸球菌

ATCC 29212

+/-

菌落針尖大小

大腸杆菌

ATCC 25922

-

/


圖1 慶大黴素瓊脂培養基微生物質控結果


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