一、試驗原理：
胰酪蛋白腖提供氮源、維生素和礦物質；葡萄糖提供碳源；氯化鈉維持均衡的滲透壓；溴麝香草酚蘭做指示劑；瓊脂是培養基的凝固劑。本培養基用於鑒別革蘭氏陰性細菌對於葡萄糖的發酵型和氧化型代謝作用。將同一菌株接種於2支培養基中，其中一支管的培養基上加石蠟等滅菌礦物油脂來隔離氧氣，另一支管不加。這樣發酵型細菌在兩管培養基中均產生酸性反應，氧化型細菌則在未加油脂的管中產生酸性反應，而在加油脂的培養管中隻有輕度或者沒有反應變化。
二、培養基配方（g/L）
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胰酪蛋白腖 |
2.0 |
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磷酸氫二鉀 |
0.3 |
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氯化鈉 |
5.0 |
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葡萄糖 |
10.0 |
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溴麝香草酚蘭 |
0.08 |
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瓊脂 |
2.0 |
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pH 7.2±0.1 25℃ |
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此配方可以進行改良或增加營養成分以獲得最佳的結果
三、 實驗方法：
取本品19.5g加1L蒸餾水，加熱溶解，分裝試管，每管3ml，116℃高壓滅菌15min。
1．用接種針挑取純培養物，同時穿刺接種兩管培養基。
2．一管接種後添加滅菌液體石蠟於培養基表麵，厚度於5mm，稱封閉管，另一管不加，稱開放管。
3． 36±1℃需氧培養24-48小時，記錄實驗結果。
四、試驗結果判斷：
各種菌對O-F培養基呈三種形式：
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質控菌株 |
菌株編號 |
代謝類型 |
開放管 |
封閉管 |
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大腸埃希氏菌 |
ATCC25922 |
發酵 |
酸（黃） |
酸（黃） |
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銅綠假單胞菌 |
ATCC27853 |
氧化 |
酸（黃） |
堿（綠） |
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糞產堿杆菌 |
CMCC40001 |
不分解糖 |
堿（綠） |
堿（綠） |
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