一、試驗原理:
本培養基主是一種鑒別腸道杆菌和大腸埃希氏菌的選擇性培養基。蛋白腖提供碳源、氮源、維生素和生長因子等營養物質;乳糖為可發酵的碳水化合物;磷酸氫二鉀作為培養基pH緩衝劑;瓊脂是培養基的凝固劑;伊紅和美藍作為鑒別指示劑,抑製革蘭氏陽性菌的生長。大腸菌群為乳糖發酵細菌,可形成藍黑色菌落;沙門氏菌和誌賀氏菌為乳糖不發酵微生物,形成無色、透明或琥珀色的菌落;不致病的、乳酸不發酵的革蘭氏陰性細菌也會在培養基上生長,需通過額外的生化試驗進行區分。
二、培養基配方(g/L):
蛋白腖 |
10.0 |
乳糖 |
10.0 |
磷酸氫二鉀 |
2.0 |
伊紅 |
0.4 |
美藍 |
0.065 |
瓊脂 |
15.0 |
pH 7.1±0.2 25℃ |
三、試驗方法:
稱取本品幹粉37.4 g,加入1.0 L蒸餾水或去離子水中,攪拌加熱煮沸至完全溶解,121℃高壓滅菌15 min,備用。
四、結果觀察與解釋
接種以下質控菌株,放置30-35℃需氧培養24-48小時。
注:回收率計算時,用TSA做對照培養基。
質控菌株 |
菌株編號 |
接種量(CFU) |
回收率 |
生長狀況 |
其它特征 |
大腸埃希氏菌 |
ATCC 25922 |
10-100 |
≥70% |
+++ |
有金屬光澤,黑色菌落 |
大腸埃希氏菌 |
ATCC 8739 |
10-100 |
≥70% |
+++ |
有金屬光澤,黑色菌落 |
金黃色葡萄球菌 |
ATCC 6538 |
100-1000 |
/ |
- |
抑製 |
鼠傷寒沙門氏菌 |
ATCC 14028 |
10-100 |
≥70% |
+++ |
無色透明菌落 |
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