一、用途:
用於霍亂弧菌分離培養。
二、實驗原理:
蛋白腖、牛肉浸粉提供氮源、維生素和礦物質,氯化鈉維持均衡的滲透壓,牛膽鹽抑製革蘭氏陽性菌的生長;瓊脂是培養基的凝固劑,偏堿性的pH有利於弧菌的生長,並能抑製部分雜菌的生長。
三、培養基配方(g/L):
蛋白腖 |
20.0 |
牛肉浸粉 |
5.0 |
氯化鈉 |
5.0 |
牛膽鹽 |
5.0 |
瓊脂 |
12.0 |
PH 8.3-8.5 |
此配方可以進行改良或增加營養成分以獲得最佳的結果
四、實驗方法:
1、稱取本品 47.0g,加熱溶解於 1000ml 蒸餾水中,分裝三角瓶,121℃高壓滅菌 15min,備用。
2、製備質控菌液。
3、選擇合適稀釋度的目標菌質控菌液0.1ml,均勻塗布於待測平板以及參比平板上,每一稀釋度接種兩個平板。
4、36±1℃倒置培養基培養18-24小時,記錄實驗結果。
五、結果觀察與解釋:
接種以下質控菌株,在36±1℃下培養18-24小時:
質控菌株 |
菌株編號 |
接種量(CFU) |
回收率 |
生長情況 |
其他特征 |
副溶血性弧菌 |
ATCC17802 |
10-100 |
≥70% |
+++ |
無色透明菌落 |
霍亂弧菌 |
/ |
10-100 |
≥70% |
+++ |
無色透明菌落,扁平濕潤 |
六、方法的局限性
本培養基僅為細菌鑒定的一部分,需做其它補充實驗。
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