硝酸鹽肉湯（軍團菌）生化管的使用原理及方法

實驗原理：

  硝酸鹽培養基中的硝酸鹽可被某些細菌還原為亞硝酸鹽，加入對氨基苯磺酸和α-萘胺試劑，可與亞硝酸鹽反應，產生一種紅色重氮化合物而呈陽性；硝酸鹽還原的最終產物也因細菌種類不同而不同，包括亞硝酸鹽、氨、分子氮和一氧化碳等。若加入對氨基苯磺酸和α-萘胺試劑後不變色，再加入少許鋅粉，如果變紅，說明培養基中的硝酸鹽未被細菌還原而仍然存在，被鋅粉還原為亞硝酸鹽後與對氨基苯磺酸和α-萘胺試劑反應顯紅色，則判定為硝酸鹽還原陰性；如果加入鋅粉後仍然不變紅，說明培養基中的硝酸鹽已被還原成亞硝酸鹽，進而分解成氨、氮等產物，判定為硝酸鹽還原陽性。

實驗方法：

1.用磨砂輪在安瓿瓶頸部劃線一圈，掰開待用；

2.將標準儲備菌株接種到非選擇性肉湯中或采用其他製備方法，製備成5 McFarland濁度（約10⁹CFU/ml）的菌懸液；

3. 吸取0.05ml-0.08ml(約1-2滴)菌懸液至生化管中，36±1℃培養24-120h後，觀察試驗結果。

結果判定：

圖1-1  硝酸鹽肉湯（還原）質控結果

備注：a:博茲曼軍團菌，b:大腸埃希氏菌，c:空白

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