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月桂基硫酸鹽蛋白腖MUG培養基的原理及實驗現象

王娟  
錄入時間:2018-11-20 13:52:27 來源:青島betway必威西汉姆联生物

一、試驗原理:

 本培養基用於大腸杆菌的O157:H7的測定(SN/T0973-2000)。

 胰蛋白腖提供碳源和氮源滿足細菌生長的需求;氯化鈉可維持均衡的滲透壓;乳糖是大腸菌群可發酵的糖類;磷酸二氫鉀和磷酸氫二鉀是緩衝劑;月桂基硫酸鈉可抑製非大腸菌群細菌的生長。大腸埃希氏菌含有的葡萄糖醛酸苷酶作用於4-甲基傘形酮-β- D葡萄糖醛酸苷(4-Methylumbellifery-β-D-Glucuronide簡稱MUG)的β糖醛酸苷鍵,使其水解,釋放的4-甲基傘形酮 在366nm紫外燈下產生藍白色熒光。97%的大腸埃希氏杆菌、10%的沙門氏菌以及少量的誌賀氏菌具有葡萄糖醛酸苷酶;而致病性大腸杆菌(包括O157:H7)不具有葡萄糖醛酸苷酶,因而不會產生熒光。

二、培養基配方(g/L):

胰蛋白腖

20.0

氯化鈉

5.0

乳糖

5.0

磷酸氫二鉀

2.75

磷酸二氫鉀

2.75

月桂基硫酸鈉

0.1

pH 6.8±0.2  25℃

三、操作步驟:

 1、製備質控菌液。

 2、把質控菌液加入試管中。

 3、在36±1℃培養24小時,記錄實驗結果。

四、微生物試驗結果:

 接種以下質控菌株,在36±1℃培養18-24小時:

質控菌株

菌株編號

接種量(CFU)

生長情況

其他特征

大腸埃希氏菌

ATCC25922

>5000

+++

產氣,有熒光

大腸埃希氏菌0157

ATCC35150

>5000

+++

產氣,無熒光

傷寒沙門氏菌

ATCC14028

>5000

+++

不產氣,無熒光

金黃色葡萄球菌

ATCC25923

>5000

+++

抑製

 

圖1-2  月桂基硫酸鹽蛋白腖MUG培養基微生物質控結果

備注:A:正常情況下拍攝,B:366nm紫外燈下拍攝;

a:大腸埃希氏菌O157,b: 大腸埃希氏菌,c: 傷寒沙門氏菌,d:金黃色葡萄球菌,e:空白對照


五、方法的局限性

 本培養基僅為細菌鑒定的一部分,需做其他補充試驗。

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 注:本文屬betway必威西汉姆联生物原創,未經允許不得轉載。

 

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