一、實驗原理:
用於沙門氏菌的選擇性分離培養
月示蛋白腖、牛肉膏提供碳源、氮源、維生素和礦物質;乳糖、蔗糖為可發酵的糖類;十二烷基硫酸鈉抑製革蘭氏陽性菌;氯化鈉維持均衡的滲透壓;硫代硫酸鈉和檸檬酸鐵銨用於檢測硫化氫的產生,使菌落中心呈黑色;瓊脂是培養基的凝固劑;溴麝香草酚蘭和酸性複紅為pH指示劑,發酵糖產酸的菌落呈橙黃色,不發酵糖的菌落為藍綠色。
二、培養基配方(g/L):
月示蛋白腖 |
12.0 |
牛肉膏 |
3.0 |
氯化鈉 |
5.0 |
乳糖 |
12.0 |
蔗糖 |
12.0 |
十二烷基硫酸鈉 |
2.0 |
酸性複紅 |
0.1 |
溴麝香草酚藍 |
0.064 |
硫代硫酸鈉 |
6.8 |
檸檬酸鐵銨 |
0.8 |
瓊脂 |
12.0 |
三、操作步驟
使用前,把製備好的平板放置室溫10-20分鍾。
1、製備質控菌液。
2、目標菌選擇合適稀釋度的質控菌液0.1ml,均勻塗布於平板上,每一稀釋度接種兩個平板。
3、非目標菌用1μL接種環取質控菌液1環,將接種環接觸容器邊緣3次去除多餘液體,在平板表麵劃六條平行直線,同時接種兩個平板。
4、36±1℃倒置培養基培養18-24小時,記錄實驗結果。
接種以下質控菌株,在36±1℃需氧培養18-24小時:
質控菌株 |
菌株編號 |
其他特征 |
鼠傷寒沙門氏菌 |
ATCC14028 |
藍綠色菌落有黑色中心 |
腸炎沙門氏菌 |
CMCC(B)50760 |
藍綠色菌落有黑色中心 |
大腸埃希氏菌 |
ATCC25922 |
黃色菌落有膽鹽沉澱環 |
金黃色葡萄球菌 |
ATCC6238 |
抑製 |
普通變形杆菌 |
ATCC13355 |
黃色菌落有黑色中心 |
圖1-2 WS瓊脂微生物質控結果
備注:a: 腸炎沙門氏菌,b:鼠傷寒沙門氏菌,c: 大腸埃希氏菌,d;普通變形杆菌,e金黃色葡萄球菌
方法的局限性
本培養基僅為細菌鑒定的一部分,需做其他補充試驗。
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