一、試驗原理:
用於糞鏈球菌的選擇型分離培養及計數.
䏡蛋白腖和酵母粉提供氮源、維生素和生長因子;麥芽糖和乳糖為可發酵糖類;氯化鈉維持均衡的滲透壓;疊氮鈉可抑製革蘭氏陰性菌;瓊脂是培養基的凝固劑;溴甲酚紫為指示劑染料;糞鏈球菌能將TTC(氯化三苯基四氮唑)還原成一種酸性的偶氮染料,顯示為深紅色菌落。
二、培養基配方(g/L):
月示蛋白腖 |
10.0 |
酵母粉 |
10.0 |
甘油磷酸鈉 |
10.0 |
氯化鈉 |
5.0 |
麥芽糖 |
20.0 |
乳糖 |
1.0 |
疊氮鈉 |
0.4 |
瓊脂 |
13.0 |
溴甲酚紫 |
0.015 |
pH 7.2±0.2 |
25℃ |
三、試驗方法:
粉體裝培養基的使用:
1.稱取本品69.4g,加熱溶解於1000ml蒸餾水中,煮沸至完全溶解,冷卻至50-60℃時,加入無菌1%TTC溶液10ml,混勻,傾入無菌平皿,備用.。
2.使用前,把製備好的平板放置室溫10-20分鍾。
3.製備質控菌液。
4.培養基冷卻至46±1℃左右時,傾入含1ml質控菌液的無菌平皿中,約15ml培養基,混勻,凝固。
5.36±1℃倒置培養基培養48±2小時,記錄實驗結果。
四、結果觀察與解釋
接種以下質控菌株,36±1℃倒置培養基培養48±2小時:
質控菌株 |
菌株編號 |
接種量(CFU) |
質控評定標準 |
結果 |
金黃色葡萄球菌 |
ATCC6538 |
/ |
G≤1 |
/ |
大腸埃希氏菌 |
ATCC25922 |
/ |
G≤1 |
/ |
腸球菌 |
/ |
20-200 |
PR≥0.7 |
紅色菌落 |
糞腸球菌 |
ATCc29212 |
20-200 |
PR≥0.7 |
紅色菌落 |
圖1-2 KF鏈球菌瓊脂質控結果
備注:a:金黃色葡萄球菌,b:大腸埃希氏菌,c:腸球菌,d:糞腸球菌
五、注意事項
本培養基僅為細菌鑒定的一部分,需做其他補充試驗。
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