一、試驗原理:
用於革蘭氏陽性球菌的分離培養。
特殊蛋白腖和可溶性澱粉提供氮源、維生素、氨基酸和碳源;氯化鈉能維持均衡的滲透壓;瓊脂是培養基的凝固劑;羊血可以支持生長要求比較苛刻的微生物生長,並可以檢測溶血反應,需要注意的是本培養基具有較高的碳水化合物含量,因此β-溶血性鏈球菌可產生綠溶血反應,可能被誤認為是α溶血;另外多粘菌素E破壞革蘭氏陰性菌的細胞壁,而萘啶酮酸可以阻礙革蘭氏陰性菌的DNA複製從而達到對革蘭氏陰性菌的抑製作用。
二、培養基配方(g/L):
特殊蛋白腖 |
23.0 |
可溶性澱粉 |
1.0 |
氯化鈉 |
5.0 |
瓊脂 |
12.0 |
萘啶酮酸 |
0.015 |
多粘菌素E |
0.01 |
pH 7.3±0.2 25℃ |
三、試驗方法:
1、稱取本品41.0g,加熱溶解於1000ml蒸餾水中,分裝三角瓶,121℃高壓滅菌15分鍾,冷卻至50℃左右時,加入5%無菌脫纖維羊血,混勻,傾入無菌平皿,備用。
2、使用前,把製備好的平板放置室溫10-20分鍾。
3、製備質控菌液。
4、將質控菌液劃線接種於待測培養基上。
5、36±1℃倒置培養基培養18-24小時,記錄實驗結果。
四、結果觀察與解釋
接種以下質控菌株,放置36±1℃需氧培養18-24小時。
質控菌株 |
菌株編號 |
接種量(CFU) |
質控評定標準 |
其他特征 |
大腸埃希氏菌 |
ATCC25922 |
/ |
/ |
/ |
金黃色葡萄球菌 |
ATCC25923 |
/ |
γ溶血環 |
/ |
溶血鏈球菌 |
ATCC32110 |
/ |
β溶血環 |
/ |
表皮葡萄球菌 |
CMCC(B)29069 |
/ |
γ溶血環 |
/ |
化膿性鏈球菌 |
ATCC19615 |
/ |
β溶血環 |
/ |
圖1-2 哥倫比亞CNA瓊脂基礎微生物質控結果
備注:a:大腸埃希氏菌,b: 金黃色葡萄球菌,c: 溶血鏈球菌,d:表皮葡萄球菌,e:化膿鏈球菌
五、注意事項
本培養基僅為細菌鑒定的一部分,需做其他補充試驗。
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