一、實驗原理:
蛋白腖和牛肉粉提供氮源、維生素、礦物質;硝酸鉀被某些細菌還原為亞硝酸鹽,如大腸埃希菌;有的細菌則可使其還原為亞硝酸鹽和離子態的銨;有的細菌能使硝酸鹽或亞硝酸鹽還原為氮,如假單胞菌等。硝酸鹽還原試驗是測定還原過程中所產生的亞硝酸。亞硝酸鹽與醋酸作用,生成亞硝酸,亞硝酸與試劑中的對氨基苯磺酸作用生成重氮基苯磺酸,後者與α-萘胺結合生成N-α萘胺偶苯磺酸。做此試驗時,應以一支未接種細菌的培養基做對照試驗,隻有對照管陰性時,才能判定。結果判定:出現紅色為陽性反應。如欲檢查培養基中硝酸鹽是否被分解,可取鋅粉少許加入培養基內,如出現紅色表明硝酸鹽仍存在;若不出現紅色,表示硝酸鹽已被分解。較少量的瓊脂作為培養基的凝固劑。
二、試驗方法:
取新鮮質控菌株斜麵,用接種針挑取菌苔穿刺接種至生化管中,36±1℃培養24h後,觀察結果,再按順序滴加硝酸鹽還原試劑,觀察實驗結果。
三、結果判定:
接種以下質控菌株,36±1℃需氧培養24小時:
質控菌株 |
菌株編號 |
生長情況 |
其他特征 |
大腸埃希氏菌 |
ATCC25922 |
良好 |
擴散生長,加硝酸鹽還原試劑甲乙液各兩滴變紅色 |
蠟樣芽胞杆菌 |
ATCC11778 |
良好 |
擴散生長,加硝酸鹽還原試劑甲乙液各兩滴變紅色 |
產氣莢膜梭菌 |
ATCC13124 |
良好 |
無動力,加硝酸鹽還原試劑甲乙液各兩滴變紅色 |
單增李斯特氏菌 |
ATCC19114 |
良好 |
擴散生長,加硝酸鹽還原試劑甲乙液各兩滴不變色 |
圖1-1 動力-硝酸鹽培養基微生物質控結果
備注:a:大腸埃希氏菌,b: 蠟樣芽胞杆菌,c: 產氣莢膜梭菌,d:單增李斯特氏菌,e:空白對照
相關產品:
注:本文屬betway必威西汉姆联生物原創,未經允許不得轉載。
上一篇:葡萄糖酪腖瓊脂原理和使用方法