一、試驗原理:
液體硫乙醇酸鹽培養基用於藥品、生物製品的無菌檢測,也可用於好氧菌和厭氧菌的檢測。
酪腖在培養基中作為基礎營養物質;酵母粉提供B族維生素;L-胱氨酸和硫乙醇酸鈉均能使體係處於低氧化還原電勢,有利於消除菌體生長代謝過程中產生的對自身有害的過氧化物質,此外L-胱氨酸的巰基(-SH)可以中和重金屬的毒性,因此可以用於帶有重金屬物質的無菌檢驗;氯化鈉維持菌體細胞生長所需的滲透壓;刃天青作為氧化還原指示劑,該指示劑氧化態為粉紅色,還原態為無色;瓊脂可阻止二氧化碳、氧氣擴散進入,從而造成厭氧環境。
二、培養基配方(g/L):
酪腖(胰酶水解)
15.0
酵母浸出粉
5.0
葡萄糖
5.0
硫乙醇酸鈉
0.5
L-胱氨酸
0.5
氯化鈉
2.5
刃天青
0.001
瓊脂
0.75
pH值7.1±0.2(25℃)
三、試驗方法:
稱取本品29.25g,加熱攪拌溶解於1000mL純化水中,分裝適宜容器,其裝量與容器高度的比例應符合,培養結束後培養基氧化層(粉紅色)不超過培養基深度的1/2。121℃高壓滅菌15分鍾迅速冷卻。在供試品接種前,培養基氧化層高度不得超過培養基深度的1/5。否則,須經100℃水浴加熱至粉紅色消失(不得超過20分鍾),迅速冷卻,隻限加熱一次,並應防止被汙染。
四、試驗結果判斷:
接種以下質控菌株,放置30-35℃需氧培養24-72小時。
質控菌株 |
菌株編號 |
接種量(CFU) |
生長情況 |
其他特征 |
金黃色葡萄球菌 |
CMCC(B) 26003 |
10-100 |
+++ |
在試管中呈顆粒生長 |
銅綠假單胞菌 |
CMCC(B) 10104 |
10-100 |
+++ |
在試管表層生長,渾濁 |
枯草芽孢杆菌 |
CMCC(B) 63501 |
10-100 |
+++ |
在試管表層生長,渾濁 |
生孢梭菌 |
CMCC(B) 64941 |
10-100 |
+++ |
渾濁 |
產氣莢膜梭菌 |
ATCC 13124 |
10-100 |
+++ |
在試管氧化層以下呈條狀生長 |
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