一、試驗原理:
平板計數瓊脂培養基用於菌落總數的測定。
胰蛋白腖提供碳源和氮源;酵母膏粉提供B族維生素;葡萄糖提供能源;瓊脂是培養基的凝固劑。
二、培養基配方(g/L):
胰蛋白腖 酵母浸粉 葡萄糖 瓊脂 pH值7.0±0.2(25℃) |
5.0 2.5 1.0 15.0
|
三、試驗方法:
稱取本品23.5g,加熱攪拌溶解於1000mL純化水中,分裝試管或錐形瓶,121℃高壓滅菌15分鍾,備用。此培養基呈淡黃色,清晰無沉澱。
四、試驗結果判斷:
接種以下質控菌株,放置36±1℃需氧培養48±2小時。
質控菌株 |
菌株編號 |
接種量(CFU) |
參比或計數培養基 |
方法 |
質控結果 |
其他特征 |
銅綠假單胞菌 |
ATCC 9027 |
20-200 |
TSA |
定量 |
PR≥0.7 |
無色透明菌落 |
大腸埃希氏菌 |
ATCC 25922 |
20-200 |
TSA |
定量 |
PR≥0.7 |
無色透明大菌落 |
枯草芽孢杆菌 |
ATCC 6633 |
20-200 |
TSA |
定量 |
PR≥0.7 |
白色不規則菌落 |
蠟樣芽孢杆菌 |
ATCC 11776 |
20-200 |
TSA |
定量 |
PR≥0.7 |
白色不規則菌落 |
金黃色葡萄球菌 |
ATCC 6538 |
20-200 |
TSA |
定量 |
PR≥0.7 |
淡黃色菌落菌落 |
a:大腸埃希氏菌 b:枯草芽孢杆菌 c:金黃色葡萄球菌 d:銅綠假單胞菌 e:蠟樣芽孢杆菌
五、注意事項
用於傾注計數時,傾注培養基的溫度過高會損傷或燙死樣品中的微生物而影響計數結果,一般傾注溫度要求45℃左右為宜,因此,該培養基的製備應選用低凝固點瓊脂以滿足檢測要求。
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