一、試驗原理
酵母浸粉、蛋白腖和酪蛋白腖提供碳氮源、維生素和生長因子;葡萄糖為可發酵的糖類;溴甲酚紫為酸堿指示劑;瓊脂為培養基凝固劑;含有色氨酸酶的細菌,能分解蛋白腖中的色氨酸,形成靛基質(吲哚)。靛基質無色,當加入對氨基苯甲酸試劑後,形成可見的紅紫色醌式化合物;某些細菌可使鳥氨酸脫羧產堿,使底層呈紫色。不能產生鳥氨酸脫羧酶的細菌因發酵葡萄糖產酸,底層呈黃色。有動力的細菌在培養基中擴散生長,無動力的細菌沿穿刺線生長。
二、培養基配方
酵母浸粉 |
3.0 |
蛋白腖 |
10.0 |
酪蛋白腖 |
10.0 |
L-鳥氨酸鹽酸鹽 |
5.0 |
葡萄糖 |
1.0 |
溴甲酚紫 |
0.02 |
瓊脂 |
2.0 |
pH 6.5±0.2 25℃ |
此配方可以進行改良或增加營養成分以獲得最佳的結果
三、試驗方法
1.稱取本品31.0g,加熱溶解於1000ml蒸餾水中,分裝試管,每管約5ml,121℃高壓滅菌15分鍾,備用。
2.取新鮮質控菌株斜麵,用接種針挑取菌苔穿刺接種於試管中,並滴加石蠟覆蓋,36±1℃培養24-48h後,滴加試劑,觀察結果。
四、結果觀察
接種以下質控菌株,36±1℃培養24-48h後:
質控菌株 |
菌株編號 |
生長情況 |
其他特征 |
鼠傷寒沙門氏菌 |
ATCC14028 |
+++ |
動力+、吲哚-、鳥氨酸+ |
大腸埃希氏菌 |
ATCC25922 |
+++ |
動力+、吲哚+、鳥氨酸+ |
肺炎克雷伯氏菌 |
ATCC13883 |
+++ |
動力-、吲哚-、鳥氨酸- |
奇異變形杆菌 |
ATCC12453 |
+++ |
動力+、吲哚-、鳥氨酸+ |
產氣腸杆菌 |
ATCC13048 |
+++ |
動力+、吲哚-、鳥氨酸+ |
a:產氣腸杆菌;b:大腸埃希氏菌;c:肺炎克雷伯氏菌;d:奇異變形杆菌;e:鼠傷寒沙門氏菌
五、注意事項
本培養基僅為細菌鑒定的一部分,需做其他補充試驗。
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