副溶血性弧菌的生化鑒定
實驗步驟:
1.挑取純培養的單菌進行革蘭氏染色及氧化酶試驗,副溶血性弧菌為革蘭氏陰性菌,氧化酶陽性實驗結果(具體實驗操作詳見betway必威西汉姆联官網)。
2.之後,用接種針從平板上挑取部分菌落至2 ml無菌生理鹽水試管中,充分振蕩,製成0.5麥氏濁度的均一細菌懸液。
3.取一支無汙染的betway必威西汉姆联生物副溶血性弧菌生化鑒定條,用酒精棉擦拭打孔器,依次打孔,用移液槍吸取100 μl菌懸液,依次加入每個孔中。其中VP半固體需采用穿刺接種:用接種針挑取純培養的單菌落,穿刺接種於生化管中。賴氨酸和氨基酸對照則需覆蓋滅菌液體石蠟:取一支無菌液體石蠟,掰開安瓿瓶,用移液槍吸取適量液體石蠟,覆蓋表層。
4.接種完後做好標記,蓋上蓋子,放置36℃±1℃培養24h。
結果觀察:
培養結束後,在記錄卡上觀察實試驗結果。
副溶血性弧菌應為
無鹽胰腖水和10%氯化鈉胰腖水陰性,不生長;6%? 8%氯化鈉胰腖水呈陽性,生長;
氨基酸對照黃色;賴氨酸脫羧酶陽性,紫色;甘露醇陽性,變黃;
VP半固體:動力陽性;加入vp試劑混勻後4h內不變色,為vp陰性;
ONPG陰性,不變色。
注意事項:
V-P試驗過程中,在培養結束後需加VP試劑(甲液:0.3ml,乙液:0.1ml),混勻後4 h內觀察結果。