革蘭氏染色操作視頻
檢驗原理:
通過結晶紫初染和碘液媒染後,在細胞壁內形成了不溶於水的結晶紫與碘的複合物,革蘭氏陽性菌由於其細胞壁較厚、肽聚糖網層次較多且交聯致密,故遇乙醇或丙酮脫色處理時,因失水反而使網孔縮小,再加上它不含類脂,故乙醇處理不會出現縫隙,因此,能把結晶紫與碘複合物牢牢留在壁內,使其仍呈紫色;而革
蘭氏陰性菌因其細胞壁薄、外膜層類脂含量高、肽聚糖層薄且交聯度差,在遇脫色劑後,以類脂為主的外膜迅速溶解,薄而鬆散的肽聚糖網不能阻擋結晶紫與碘複合物的溶出,因此通過乙醇脫色後仍呈無色,再經沙黃等紅色染料複染,就使革蘭氏陰性菌呈紅色。
操作步驟:
1. 塗片經火焰固定,加(結晶紫溶液)溶液A染1分鍾,用清水衝去染液。
2.加(碘液)溶液B染1分鍾,水洗。
3.加(95%乙醇)溶液C,不時搖動玻片約10-30秒,至無紫色脫落為止,水洗。
4.加(沙黃複染液)溶液D,染1分鍾,水洗。
5.幹後油鏡鏡檢。陽性菌呈紫色、陰性菌呈淡紅色。