1.方法一
（1）培養基
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L-色氨酸 |
3g |
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KH2PO4 |
1g |
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K2HPO4 |
1g |
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NaCl |
5g |
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乙醇（95%） |
10ml |
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蒸餾水 |
900ml |
加酚紅至微橙的黃色(25-30mg), pH約為6.8-6.9,分裝於三角瓶中，121℃蒸氣滅菌20min。另將20g尿素溶於100ml水中，過濾滅菌，用無菌操作與上述熱滅菌的培養基相混，並分裝於無菌試管內，每管液層高約3～4cm。
（2）接種與測定：將試驗菌株的幼齡培養物接種於上述培養液中，適溫培養24h,取2～4滴培養液，與1滴三氯化鐵溶液（約33%）相混。如呈紅褐色，則為色氨酸脫氨酶陽性反應。如無顏色變化則為陰性反應。可用變形菌作為陽性對照。
（3）結果觀察：如培養後的培養液由黃色轉紅色，表示有脲酶存在。如用對二甲基氨基苯甲醒試劑測定，可檢查有無吲哚形成。如不擬測定脲酶，配製培養基時可不加酚紅和尿素。
2.方法二
（1）試液
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L-色氨酸 |
0.%～0.5% |
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生理鹽水或pH6.8緩衝液（A液與B液相混即為pH6.8的緩衝液） |
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A液：KH2PO4,1/5mol/L（27.2g/L） |
50ml |
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B液：NaCO3，1/5mol（8.0g/L） |
23.6ml |
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FeCl3 |
33% |
（2）接種與培養
將試驗菌接種於肉汁陳斜麵，適溫培養24h。
（3）測定方法
測定方法：取幹淨的試管二支，每管中加四滴L-色氨酸0.2%-0.5％溶液和四滴生理鹽水（或四滴pH6.8緩衝液A和B)，然後將測定菌的菌苔混到上述溶液的二支試管中製成濃菌液。另二支試管中不加菌苔作為對照。置室溫15-20 min後，每管中加入一滴三氯化鐵（33%）溶液，立即呈現紅褐色，表示陽性反應， 不變色者表示陰性反應。可用變形菌作為陽性對照。
本文節選自《常見細菌係統鑒定手冊》第十四章。
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