一、實驗原理
酒石酸鹽試驗是腸杆科菌鑒定常用的生化實驗,有一些細菌可以產生特定的酶將酒石酸鹽分解為乙酸等比較簡單的有機酸,使pH值下降,遇到酚紅指示劑後變黃色,而不產該酶的細菌仍為紅色。需要注意的是,該實驗需在接菌後覆蓋一層無菌的液體石蠟以隔絕氧氣,避免乙酸等氧化分解,導致pH值重新升高又變為紅色,從而造成假陰性。
二、試驗方法
選取甲型副傷寒沙門氏菌、乙型副傷寒沙門氏菌、鼠傷寒沙門氏菌,分別穿刺接種至酒石酸鹽生化管中,為了驗證氧氣對該實驗的影響,每種菌做兩管,其中一管覆蓋無菌液體石蠟,另一管不覆蓋。37度培養18小時、24小時各觀察一次結果。
三、實驗結果
1、不加石蠟生化管,培養18小時。
由上圖可發現,鼠傷寒沙門氏菌底部有變黃,為陽性反應,甲型副傷寒沙門氏菌、乙型副傷寒沙門氏菌為紅色,為陰性反應。
2、不加石蠟生化管,培養24小時。
由上圖可發現,鼠沙由黃色變為紅色,說明此時產生的乙酸被氧化分解,導致pH值又重新升高變為紅色。
3、培養24小時,加石蠟組與不加石蠟組對照。
鼠傷寒沙門氏菌
甲型副傷寒沙門氏菌
乙型副傷寒沙門氏菌
由上圖可以發現加石蠟組,黃色會穩定存在,不會被氧化為開始的紅色,且黃色更為明顯,更有助陽性結果的判定。
四、結論
在做酒石酸鹽生化實驗時,接菌後應該覆蓋一層無菌液體石蠟,防止實驗結果被氧化,造成假陰性。
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