一、培養基用途：

  用於克羅諾杆菌的選擇性增菌培養。

二、原理：

  胰蛋白腖在培養基為微生物生長提供所需的碳源、氮源、維生素、氨基酸及生長因子；氯化鈉維持滲透壓；磷酸鹽提供相對穩定的酸堿緩衝體係，月桂基磷酸鈉抑製非大腸菌群類細菌的生長

  按照GB4789.28-2024《食品安全國家標準 食品微生物學檢驗 培養基和試劑的質量要求》中改良月桂基硫酸鹽胰蛋白腖肉湯-萬古黴素（mLST-vm）質量控製方法，與舊版國標GB4789.28-2013相比，存在一點改動，新版國標刪除了大腸埃希氏菌ATCC 25922，將舊版國標的附錄D和附錄E合並為新版的附錄F一種質量控製方法。現按照新版國標對其進行檢測。

三、培養基成分

四、操作方法

  1、稱取本品64.6g，加熱溶解於1000ml蒸餾水中，分裝錐形瓶，每瓶100ml，121℃高壓滅菌15分鍾，冷卻至45-50℃時，每100ml培養基加入過濾除菌的萬古黴素（1mg/ml）1支，混勻分裝無菌試管，每管10ml備用。

  2、製備工作菌懸液。

  3、接種

  目標菌（阪崎克羅諾杆菌ATCC 29544）：接種10CFU-100CFU/管，接種體積不超過1mL，接種兩個平型管。同時將1mL菌懸液（與試管同一稀釋度）傾注平板（或適宜稀釋度0.1mL塗布平板）接種兩個平板，做接種量計數用。

  非目標菌（糞腸球菌ATCC 29212）：接種1000CFU-5000CFU/管，接種體積不超過1mL，接種兩個平型管。同時將1mL菌懸液（比待測培養基試管接種小10-100倍稀釋度）傾注平板（或適宜稀釋度0.1mL塗布平板）接種兩個平板，做接種量計數用。

圖一： mLST-vm培養基44±0.5℃培養24±2小時後

  4、44±0.5℃培養24±2小時後轉接平板。

  目標菌（阪崎克羅諾杆菌ATCC 29544）：吸取10ul培養液均勻塗布或螺旋塗布到阪崎腸杆菌顯色平板。（注：此處與舊版國標不同，舊版國標為取10ul培養液劃線接種至阪崎腸杆菌顯色培養基）

  非目標菌（糞腸球菌ATCC 29212）：吸取10ul培養液均勻塗布或螺旋塗布到非選擇性平板上（如：TSA）。

  5、將轉接後的平板置於36±1℃培養24±2小時。

圖二：試管轉接平板後試驗現象

五、實驗結果

相關產品：

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相關標準：

GB4789.28-2024《食品安全國家標準 食品微生物學檢驗 培養基和試劑的質量要求》

注：本文屬betway必威西汉姆联生物原創，未經允許不得轉載。

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