一、雙歧杆菌屬情況簡要介紹:
雙歧杆菌(Bifidobacterium)是1899年由法國學者Tissier從母乳營養兒的糞便中分離出的一種厭氧的革蘭氏陽性杆菌。雙歧杆菌是有益菌的代表,其中的嬰兒雙歧杆菌(B.infantis)、青春雙歧杆菌(B.adolescentis)、長雙歧杆菌(B.longum)和短雙歧杆菌(B.breve)等已廣泛用於藥品或含活菌醫療保健品——微生態調節劑的生產上。
雙歧杆菌屬於放線菌科,不抗酸、無芽孢,無動力,菌體形態多樣,呈短杆狀、纖細杆狀或球形,可形成各種分支或分叉形態。發酵碳水化合物活躍,發酵產物主要是乙酸和乳酸,二者的摩爾比是3:2,不產生二氧化碳,不產生丁酸和丙酸,觸酶陰性。
雙歧杆菌的鑒定通常是用雙歧杆菌瓊脂厭氧培養基進行分離計數,最後進行塗片鏡檢、生化鑒定及有機酸代謝產物測定。
二、產品用途及原理:
該培養基用於雙歧杆菌的分離培養。
蛋白腖和酵母浸粉提供微生物生長所需的碳源、氮源、維生素和生長因子;可溶性澱粉可提供碳源;葡萄糖為可發酵糖類;吐溫80、肝浸粉、番茄浸粉和L-半胱氨酸為培養各種雙歧杆菌提供生長因子;氯化鈉維持均衡的滲透壓;瓊脂是培養基的凝固劑。
三、培養基配方(g/L):
蛋白腖 |
15.0 |
葡萄糖 |
20.0 |
酵母浸粉 |
2.0 |
可溶性澱粉 |
0.5 |
氯化鈉 |
5.0 |
L-半胱氨酸 |
0.5 |
番茄浸粉 |
5.0 |
肝浸粉 |
0.3 |
瓊脂 |
20.0 |
pH值6.8±0.2(25℃) |
四、試驗方法:
1. 稱取本品70.0g,再吸取1mL吐溫80,加熱溶解於1000mL蒸餾水中,分裝三角瓶,121℃高壓滅菌15min-20min,稍冷後傾入無菌平皿,待凝固後備用。
2. 10倍梯度稀釋法製備質控菌株菌懸液,吸取適宜梯度的菌懸液塗布接種於待測培養基和參比培養基;
3. 放置於恒溫培養箱36℃±1℃厭氧培養48h,觀察試驗結果。
五、試驗結果判斷:
接種以下質控菌株,放置36℃±1℃厭氧培養48h,試驗結果如圖1所示。
質控菌株 |
菌株編號 |
接種量(CFU) |
參比或計數培養基 |
方法 |
生長情況 |
其他特征 |
長雙歧杆菌 |
CICC 6068 |
10-100 |
MRS |
定量 |
PR≥0.7 |
圓形凸起,奶油色,邊緣整齊 |
嬰兒雙歧杆菌 |
CICC 6069 |
10-100 |
MRS |
定量 |
PR≥0.7 |
圓形凸起,奶油色,邊緣整齊 |
圖1 雙歧杆菌瓊脂培養基微生物質控結果
六、注意事項
嬰兒雙歧杆菌為厭氧菌,氧氣對其有毒害作用,應在厭氧操作箱中操作,若是在正常環境中操作,從厭氧菌暴露在空氣中開始到放入厭氧環境中培養結束,整個過程應盡可能快速操作,一般不超過15分鍾,暴露時間越長,厭氧菌越容易死亡。
厭氧菌培養相關信息可參考原創文章:專性厭氧菌的培養方法及注意事項-點擊查看。
相關產品:
注:本文屬betway必威西汉姆联生物原創,未經允許不得轉載。
上一篇:真菌培養基原理和使用方法