微生物的分類依據
1. 形態特征
(1)個體形態 鏡檢細胞形狀、大小、排列,革蘭氏染色反應,運動性,鞭毛位置、數目,芽孢有無、形狀和部位,莢膜,細胞內含物;放線菌和真菌的菌絲結構,孢子絲、孢子囊或孢子穗的形狀和結構,孢子的形狀、大小、顏色及表麵特征等。
(2)培養特征
1)在固體培養基平板上的菌落(colony)和斜麵上的菌苔(lawn)性狀(形狀、光澤、透明度、顏色、質地等);
2)在半固體培養基中穿刺接種培養的生長情況;
3)在液體培養基中混濁程度,液麵有無菌膜、菌環,管底有無絮狀沉澱,培養液顏色 等。
2.生理生化特征
(1)能量代謝 利用光能還是化學能;
(2)對O2的要求 專性好氧、微需氧、兼性厭氧及專性厭氧等;
(2)營養和代謝特性 所需碳源、氮源的種類,有無特殊營養需要,存在的酶的種類等。
3.生態習性
生長溫度,酸堿度,嗜鹽性,致病性,寄生、共生關係等。
4.血清學反應
用已知菌種、型或菌株製成抗血清,然後根據它們與待鑒定微生物是否發生特異性的血清學反應,來確定未知菌種、型或菌株。
5 噬菌反應
菌體的寄生有專一性,在有敏感菌的平板上產生噬菌斑,斑的形狀和大小可作為鑒定的依據;在液體培養中,噬菌體的侵染液由混濁變為澄清。噬菌體寄生的專業性有差別,寄生範圍廣的謂多價噬菌體,能侵染同一屬的多種細菌;單價噬菌體隻侵染同一種的細菌;極端專業化的噬菌體甚至隻對同一種菌的某一菌株有侵染力,故可尋找適當專化的噬菌體作為鑒定各種細菌的生物試劑。
6 細胞壁成分
革蘭氏陽性細菌的細胞壁含肽聚糖多,脂類少。革蘭陰性細菌與之相反。鏈黴菌屬(Streptomyces)的細胞壁含丙氨酸、穀氨酸、甘氨酸和2,6-氨基庚二酸,而含有阿拉伯糖是諾卡氏菌屬(Nocardia)的特征。黴菌細胞壁則主要含幾丁質。
7 紅外吸收光譜
利用紅外吸收譜技術測定微生物細胞的化學成分,了解微生物的化學性質,作為分類依據之一。
8 GC含量
生物遺傳的物質基礎是核酸,核酸組成上的異同反映生物之間的親緣關係。就一種生物的DNA來說,它的堿基排列順序是固定的。測定四種堿基中鳥嘌呤(G)和胞密啶(C)所占的摩爾百分比,就可了解各種微生物DNA分子不同源性程度。親緣關係接近的微生物,它們的G+G含量相同或近似的兩種微生物,不一定緊密相關,因為它們的DNA的四個堿基的排列順序不一定相同。
9 DNA雜合率
要判斷微生物之間的親緣關係,須比較它們的DNA的堿基順序,最常用的方法是DNA雜合法。其基本原理是DNA解鏈的可逆性和堿基配對的專一性。提取DNA並使之解鏈,再使互補的堿基重新配對結合成雙鏈。根據能生成雙鏈的情況,可測知雜合率。雜合率越高,表示兩個DNA之間堿基順序的相似越高,它們間的親緣關係也就越近。
10 核糖體核糖酸(rRNA )相關度
在DNA相關度低的菌株之間,rRNA同源性能顯示它們的親緣關係。Rrna-DNA分子雜交試驗可沒定Rrna的相關度,揭示Rrna 的同源性。
11 rRNA的堿基順序
RNA的堿基順序由DNA轉錄來的,故完全具有相對應的關係。提取並分離細菌內標記的16SrRNA,以核糖核酸消化,可獲得各種寡核苷酸,測定這些寡核苷酸上的堿基順序,可作為細菌分類學的一種標記。
12 核糖體蛋白的組成分析
分離被測細菌的30S和50S核糖體蛋白亞單位,比較其中所含核糖體蛋白的種類及其含量,可將被鑒定的菌株分為若幹類群,並繪製係統發生圖。
13 其它
如脂類分析、核磁共振(NMR)譜、細胞色素類型以及輔酶Q的種類(所含異間二烯側鏈的長度)等。
上一篇:微生物的分類單位與命名
下一篇:微生物的分類係統