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四硫磺酸鹽煌綠增菌液基礎(TTB)原理及現象

王娟 
錄入時間:2017-5-16 16:42:45 來源:青島betway必威西汉姆联生物

用途:用於沙門氏菌選擇性增菌培養(GB4789.28-2013,GB4789.4-2010,SN/T2206.1-2008和SN0170-92,ISO標準)。

原理:蛋白腖和牛肉粉提供碳源、氮源和維生素,滿足細菌生長的需求;氯化鈉可維持均衡的滲透壓;碳酸鈣能中和細菌產酸及吸收有毒的代謝產物;硫代硫酸鈉和四硫磺酸鈉結合可抑製腸道共生菌(四硫磺酸鈉是在培養基加入碘和碘化鉀時形成),而具有四硫磺酸鈉還原酶的細菌能在此培養基中繁殖;膽鹽和煌綠可抑製大腸群菌和其它革蘭氏陽性細菌。

操作步驟:

1、製備質控菌液。

2、接種

2.1混合菌的接種

在裝有待測培養基的試管中接種10-100CFU的目標菌,並接種1000-5000CFU的非目標菌,接種總量1ml,同時接種兩個平行管,混勻。同時分別將目標菌菌懸液(與試管接種同一稀釋度)和非目標菌菌懸液(比試管接種小10-100倍稀釋度)1ml傾注平板,接種兩個平板,作接種量計數用,42±1℃培養18-24小時。

2.2非目標菌接種

在裝有待測培養基的試管中接種1000-5000CFU的非目標菌,接種量1ml,同時接種兩個平行管,混勻,42±1℃培養18-24小時。

3、培養液的接種

3.1混合菌培養液的接種

用10μL接種環取1環經培養後的混合菌培養液,換線接種到XLD上,每管接種一個平板,36±1℃培養18-24小時。

3.2非目標菌培養液的接種

吸取10μL經培養後的非目標菌培養液,均勻塗布接種到TSA上,每管接種一個平板。也可使用傾注法進行接種,36±1℃培養18-24小時。

4、記錄實驗結果

目標菌在選擇性平板上的菌落應>10CFU,則表示待測液提培養基的生長率良好;非目標菌在非選擇性平板上的菌落<100CFU,則表示待測液體培養基的選擇性為良好。

微生物試驗:

接種以下質控菌株,在42±1℃培養18-24小時:

 

 四硫磺酸鹽煌綠增菌液基礎(TTB)微生物質控結果

a:傷寒沙門氏菌,b: 鼠傷寒沙門氏菌,c: 大腸埃希氏菌,d:金黃色葡萄球菌,e:空白對照


方法的局限性

本培養基僅為細菌鑒定的一部分,需做其他補充試驗。


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注:本文屬betway必威西汉姆联生物原創,未經允許不得轉載。

 

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