麥氏比濁管的配比如下:
管 號(McFarland) |
0.5 |
1 |
2 |
3 |
4 |
5 |
0.25%BaCl2(ml) |
0.2 |
0.4 |
0.8 |
1.2 |
1.6 |
2.0 |
1%H2SO4(ml) |
9.8 |
9.6 |
9.2 |
8.8 |
8.4 |
8.0 |
細菌的近似濃度(×108/ml) |
1 |
3 |
6 |
9 |
12 |
15 |
操作方法:
1、輕搖標準試管。
2、無菌操作將被測定的肉湯培養物加到與標準管相同直徑(大小)的無菌試管中。
3、以無菌操作向被測定試管加入無菌生理鹽水(NaCl),直到濃度與所要求的標準管的濃度相同。
使用技巧:
1、直接用眼睛看(需要經驗,誤差較大)。
2、找張白紙,打上平行直線,然後看(利用光在不同濃度液體折射不同)。
注意事項:
1、如果測定的肉湯培養物不澄清,由培養物的值減去未接種培養基的值來校正細菌濃度。4號管(肉湯培養物)-1號管(孵育過的未接種的肉湯管)=3號管(校正讀數)。
2、如果肉湯顏色很深,把未接種試管放在標準管的後麵讀數即可。
注:
1、測定好的細菌,最好做一下梯度稀釋塗布計數。
2、此濃度是對應的大腸杆菌的濃度,如果是其他細菌,會有一定的差別,但編者做過的幾個菌差別都在一個數量級之內,適合於普通實驗。
3、此種方法測定的準確性不是很高,如果是對細菌數量要求較精確的,請用紫外分光光度計。
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