一、實驗原理:
培養基為含尿素、蛋白腖成分的半固體培養基,指示劑為酚紅。具有色氨酸酶的細菌能分解蛋白腖中的色氨酸產生吲哚,加入吲哚試劑後,培養基與吲哚試劑的界麵會變紅;具有尿素酶的細菌能分解尿素產生氨,使整個培養基變堿呈紅色;有動力的細菌沿穿刺線擴散生長。
二、試劑與器材:
1.菌種大腸埃希氏菌、普通變形杆菌。
2.培養基MIU培養基等。
3.試劑吲哚(靛基質)試劑。
三、操作步驟:
將大腸埃希氏菌和普通變形杆菌穿刺接種於MIU培養基,35℃培養18h~24h,觀察動力和尿素酶反應後,再滴加吲哚試劑。
四、試驗結果:
大腸埃希氏菌動力陽性,吲哚陽性,尿素酶陰性;普通變形杆菌動力陽性,吲哚陽性,尿素酶陽性。
五、注意事項:
滴加吲哚試劑需沿管壁徐徐滴入,稍待片刻即觀察培養基與吲哚試劑的界麵是否出現紅色化合物,隨著時間的推移,紅色化合物會擴散以至不清晰。
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