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肝肉瓊脂培養基原理和質控方法

薑澤恂
錄入時間:2021-6-4 10:32:39 來源:青島betway必威西汉姆联生物

一、用途


 用於亞硫酸鹽還原厭氧孢子的計數。


二、培養基配方(g/L)


肝浸粉

20.0

葡萄糖

0.75

澱粉

0.75

亞硫酸鈉

1.2

檸檬酸鐵銨

0.5

碳酸鈉

0.67

瓊脂

11.0

PH值7.2±0.2

25℃

此配方可以進行改良或增加營養成分以獲得最佳的結果


三、原理


 肝浸粉提供碳氮源、維生素和生長因子;葡萄糖澱粉提供碳源;亞硫酸鈉和檸檬酸鐵銨用於檢測硫化氫的產生,使菌落中心呈黑色;瓊脂為凝固劑;碳酸鈉可以中和細菌生長產生的酸。


四、試驗方法


 1、稱取本品34.87g,加熱溶解於1000ml蒸餾水中,分裝,121℃高壓滅菌15min,備用。


 2、製備質控菌液,選擇合適稀釋梯度的質控菌1ml加入無菌平皿內,做平行。每個平皿傾注46℃的肝肉瓊脂15ml,混勻。凝固後傾注肝肉瓊脂覆蓋平板表層。


 3、在36℃培養24-48小時,記錄實驗結果。


五、結果觀察與解釋


 接種以下質控菌株,在36℃培養24-48小時:

質控菌株

菌株編號

接種量(CFU)

回收率

生長情況

其他特征

產氣莢膜梭菌

ATCC13124

10-100

≥70%

+++

黑色菌落


 肝肉瓊脂培養基微生物質控結果:

產氣莢膜梭菌

黑色菌落


六、注意事項


 本培養基僅為細菌鑒定的一部分,需做其他補充試驗。


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 注:本文屬betway必威西汉姆联生物原創,未經允許不得轉載。

 

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