一、原理
用MH肉湯將抗菌藥物進行一係列稀釋後,定量接種待檢菌,培養後進行觀察,抑製待檢菌肉眼可見生長的最低藥物濃度,即為該藥物對待檢菌的最低抑菌濃度(MIC)。該結果對於臨床上的細菌感染治療或動物感染治療具有重要的指導意義。
二、操作方法
1.澄清MH肉湯培養基幹粉21g,加熱溶解於1000mL純化水中,分裝至小試管,第一管分裝4mL,後麵每管分裝2mL,121℃滅菌15min。也可先將培養基滅菌,後分裝於無菌試管。
2.將試管進行編號,在第一支管中加入相應的抗菌藥物,使抗菌藥物濃度為128mg/L,混合均勻,吸取2mL加入至第二支試管中混合均勻,再吸取2mL加入至第三支試管中混合均勻,依次操作至第十三支試管,將第十三支試管吸取2mL舍去,此時第1-13管的藥物濃度依次為128、64、32、16、8、4、2、1、0.5、0.25、0.125、0.0625、0.03125mg/L(也可根據實際情況改變藥物濃度或增加稀釋度),第14和15支試管不含抗菌藥物。
3.將活化好的待測菌株用生理鹽水製成含菌量為107CFU/mL的菌懸液,向第1-14支試管中分別加入0.1mL菌懸液,置35-37℃培養18-24h(或其他適宜的生長條件),觀察生長情況。
三、生長現象
以野生分離到的一株大腸杆菌為例,測試多粘菌素B對該菌的最低抑菌濃度,結果如下圖,第1-9支試管澄清,第10支試管開始有明顯渾濁生長,說明多粘菌素B對該大腸杆菌的最低抑菌濃度為0.5mg/L。
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