1 主題內容與適用範圍
本標準規定了各類糧食、食品和飲料黴菌和酵母菌計數的檢驗方法。
本標準適用於各類糧食、食品和飲料中黴菌和酵母菌的計數。
2 引用標準
GB 4789.28 食品衛生微生物學檢驗 染色法、培養基和試劑
3 設備和材料
3．1 溫箱：25～28℃。
3．2 振蕩器。
3．3 平天。
3．4 顯微鏡。
3．5 玻塞三角瓶：300 mL。
3．6 試管：15 mm×150 mm。
3．7 平皿：直徑9 cm。
3．8 吸管：1 mL及 10 mL。
3．9 酒精燈。
3．10 載物玻片。
3．11 蓋玻片。
3．12 廣口瓶。
3．13 牛皮紙袋：121℃滅菌20 min。
3．14 金屬勺、刀等。
3．15 試管架。
3．16 接種針。
3．17 橡皮乳頭。
4 培養基和試劑
4．1 馬鈴薯-葡萄糖瓊脂培養基，附加抗菌素，按GB 4789.28 中4.79 規定。
4．2 孟加拉紅培養基：按GB 4789.28 中4.81 規定。
4．3 高鹽察氏培養基：按GB 4789.28 中4.78 規定。
4．4 滅菌蒸餾水。
4．5 乙醇。
5 檢驗程序
檢驗程序如下：
6 操作步驟
6．1 采樣：取樣時須特別注意樣品的代表性和避免采樣時的汙染。首先準備好
滅菌容器和采樣工具，如滅菌牛皮紙袋或廣口瓶，金屬刀或勺等。在衛生學調查
基礎上，采取有代表性的樣品。樣品采集後應盡快檢驗，否則應將樣品放在低溫
幹燥處。
糧食（包括糧庫貯糧，糧店或家庭小量存糧）樣品的采集，可根據糧囤或糧
垛的大小和類型，分層定點取樣，一般可分三層五點，或分層隨機采取不同點的
樣品，充分混合後，取500 g左右送檢。小量存糧可使用金屬小勺采取上、中、
下各部位的混合樣品。
海運進口糧的采樣：每一船倉采取表層、上層、中層及下層四個樣品，每層
從五點取樣混合，如船倉盛糧超過 10000 t，則應加采一個樣品。必要時采取有
疑問的樣品送檢。
穀物加工製品（包括熟飯、糕點、麵包等）、發酵食品、乳及乳製品以及其
他液體食品，用滅菌工具采集可疑黴變食品 250 g，裝入滅菌容器內送檢。
6．2 以無菌操作稱取檢樣 25 g（或 25 mL），放入含有225 mL滅菌水的玻塞三
角瓶中，振搖 30 min，即為 1：10 稀釋液。
6．3 用滅菌吸管吸取1：10稀釋液 10 mL，注入試管中，另用帶橡皮乳頭的1 mL
滅菌吸管反複吹吸 50 次，使黴菌孢子充分散開。
6．4 取1 mL1：10稀釋液注入含有 9 mL滅菌水的試管中，另換一支 1 mL滅菌
吸管吹吸 5 次，此液為 1：100 稀釋液。
6．5 按上述操作順序做10倍遞增稀釋液，再稀釋一次，換用一支1 mL滅菌吸
管，根據對樣品汙染情況的估計，選擇 3 個合適的稀釋度，分別在做 10 倍稀釋
的同時，吸取 1 mL 稀釋液於滅菌平皿中，每個稀釋度做 2 個平皿，然後將涼至
45℃左右的培養基注入平皿中，待瓊脂凝固後，倒置於 25～28℃溫箱中，3 d
後開始觀察，共培養觀察 5 d。
6．6 計算方法：通常選擇菌落數在10～150之間的平皿進行計數，同稀釋度的
2個平皿的菌落平均數乘以稀釋倍數，即為每克 （或毫升）檢樣中所含黴菌和酵
母數。
6．7 報告：每克（或毫升）食品所含黴菌和酵母數以個/g（個/mL）表示。
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