1.目的 本規程旨在為無菌操作及無菌室的保護提供一個標準化規程。
2.適用範圍 生測實驗室
3.責任者 QC主管生測員
4.定義 無
5.安全注意事項 嚴格無菌操作，防止微生物汙染；操作人員進入無菌室應先關掉紫外燈。
6.規程
6.1.無菌室應設有無菌操作間和緩衝間，無菌操作間潔淨度應達到10000級，室內溫度保持在20-24℃，濕度保持在45-60%。超淨台潔淨度應達到100級。
6.2.無菌室應保持清潔，嚴禁堆放雜物，以防汙染。
6.3.嚴防一切滅菌器材和培養基汙染，已汙染者應停止使用。
6.4.無菌室應備有工作濃度的消毒液，如5％的甲酚溶液，70％的酒精，0.1％的新潔爾滅溶液，等等。
6.5.無菌室應定期用適宜的消毒液滅菌清潔，以保證無菌室的潔淨度符合要求。
6.6.需要帶入無菌室使用的儀器，器械，平皿等一切物品，均應包紮嚴密，並應經過適宜的方法滅菌。
6.7.工作人員進入無菌室前，必須用肥皂或消毒液洗手消毒，然後在緩衝間更換專用工作服，鞋，帽子，口罩和手套(或用70%的乙醇再次擦拭雙手)，方可進入無菌室進行操作。
6.8.無菌室使用前必須打開無菌室的紫外燈輻照滅菌30分鍾以上，並且同時打開超淨台進行吹風。操作完畢，應及時清理無菌室，再用紫外燈輻照滅菌20分鍾。
6.9.供試品在檢查前，應保持外包裝完整，不得開啟，以防汙染。檢查前，用70％的酒精棉球消毒外表麵。
6.10.每次操作過程中，均應做陰性對照，以檢查無菌操作的可靠性。
6 .11.吸取菌液時，必須用吸耳球吸取，切勿直接用口接觸吸管。
6.12.接種針每次使用前後，必須通過火焰灼燒滅菌，待冷卻後，方可接種培養物。
6.13.帶有菌液的吸管，試管，培養皿等器皿應浸泡在盛有5%來蘇爾溶液的消毒桶內消毒，24小時後取出衝洗。
6.14.如有菌液灑在桌上或地上，應立即用5%石碳酸溶液或3％的來蘇爾傾覆在被汙染處至少30分鍾，再做處理。工作衣帽等受到菌液汙染時，應立即脫去，高壓蒸汽滅菌後洗滌。
6.15.凡帶有活菌的物品，必須經消毒後，才能在水龍頭下衝洗，嚴禁汙染下水道。
6.16.無菌室應每月檢查菌落數。在超淨工作台開啟的狀態下，取內徑90mm的無菌培養皿若幹，無菌操作分別注入融化並冷卻至約45℃的營養瓊脂培養基約15ml，放至凝固後，倒置於30～35℃培養箱培養48小時，證明無菌後，取平板3～5個，分別放置工作位置的左中右等處，開蓋暴露30分鍾後，倒置於30～35℃培養箱培養48小時，取出檢查。100級潔淨區平板雜菌數平均不得超過1個菌落，10000級潔淨室平均不得超過3個菌落。如超過限度，應對無菌室進行徹底消毒，直至重複檢查合乎要求為止。
7.參照 《藥品衛生檢驗方法》 《中國藥品檢驗標準操作規範》中 (無菌檢查法)章節 中華人民共和國醫藥行業標準
YY/T0188.6-1995《藥品檢驗操作規程》
8.分發部門 質量管理部
無菌室技術指導說明
在獲得了無菌環境和無菌材料後，我們還要保持無菌狀態，才能對某種特定的已知微生物進行研究或利用它們的功能，否則外界的各種微生物很容易混入。外界不相幹的微生物混入的現象，在微生物學中我們叫做汙染雜菌。防止汙染是微生物學工作中十分關鍵的技術。一方麵是徹底滅菌，另一方麵防止汙染，是無菌技術的兩個方麵。另外，我們還要防止所研究的微生物，特別是致病微生物或經過基因工程改造了的本來自然界不存在的微生物從我們的實驗容器中逃逸到外界環境中去。為了這些目的，在微生物學中，有許多措施。
無菌室一般是在微生物實驗室內專辟一個小房間。可以用板材和玻璃建造。麵積不宜過大，約 4 — 5 平方米即可，高 2.5米左右。無菌室外要設一個緩衝間，緩衝間的門和無菌室的門不要朝向同一方向，以免氣流帶進雜菌。無菌室和緩衝間都必須密閉。室內裝備的換氣設備必須有空氣過濾裝置。無菌室內的地麵、牆壁必須平整，不易藏汙納垢，便於清洗。工作台的台麵應該處於水平狀態。無菌室和緩衝間都裝有紫外線燈，無菌室的紫外線燈距離工作台麵1 米。工作人員進入無菌室應穿滅過菌的服裝，戴帽子。
當前無菌室多存在於微生物工廠，一般實驗室則使用超淨台。超淨台其主要功能是利用空氣層流裝置排除工作台麵上部包括微生物在內的各種微小塵埃。通過電動裝置使空氣通過高效過濾器具後進入工作台麵，使台麵始終保持在流動無菌空氣控製之下。而且在接近外部的一方有一道高速流動的氣簾防止外部帶菌空氣進入。
在條件較困難的地方，也可以用木製無菌箱代替超淨台。無菌箱結構簡單，便於移動，箱正麵開有兩個洞，不操作時用推拉式小門擋住，操作時可以將雙臂伸進去。正麵上部裝有玻璃，便於在內部操作，箱內部裝有紫外線燈，從側麵小門可以放進去器具和菌種等。
無菌操作技術當前不僅在微生物學研究和應用上起著舉足輕重的作用，而且在許多生物技術中也被廣泛應用。例如轉基因技術、單克隆抗體技術等
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