花藥培養
花藥培養改變花粉的發育程序，使其分裂形成細胞團，進而分化成胚狀體，產後再生植株，或形成愈傷組織，由愈傷組織再分化成植株。
1.1 花藥的材料選擇
一般選擇單核期 此時細胞核較大居中，稱單核中央期。隨著細胞體積迅速增大，細胞核由中央位置推向一邊，即單核靠邊期。以上均為單核期花粉。
單核期的確定 根據細胞觀察推測，雙核期的花粉中開始積累澱粉，不能使花粉發育成植株。通常采用醋酸洋紅或碘化鉀染色，再壓片鏡檢，以確定花粉的發育時期。但是接種前不可能把所有的花粉都進行一次發育時期的鏡檢，通常是按照花蕾長度大小與花粉發育年齡的相關性，在實際操作中取一定大小的花蕾進行的。如水稻選擇劍葉葉枕抽出距下一葉，葉枕約為4～6cm的孕穗稻。
1.2培養基的選擇
花藥培養所采用的培養基是MS、N6、B5等。添加的激素有6-BA、KT和玉米素， 2.4-D，NAA和IAA等。誘導愈傷組織的培養基可添加2.4-D，其濃度為1～3mg/l，分化培養基可添加2～3mgBA，再加少許的IAA（0.2～0.5mg/l），生根培養基可單獨添加生長素（0.5～ 1mg/l）。
基本培養基中的蔗糖濃度對花粉的誘導生長有一定作用。在辣椒花藥培養中以6%的蔗糖濃度對胚狀體的誘導率為最高。
1.3消毒接種培養
花藥消毒，從健壯無病植株采集花蕾，因為未開放的花蕾中的花藥為花被包裹，本身處於無菌狀態，可僅用70%酒精棉球將花的表麵擦洗即可。也可按對其它器官消毒處理方法進行，先用70%的酒精浸一下後，在飽和漂白粉溶液中浸10～20min，或用0.1%升汞液消毒7～10min，然後用無菌水洗3～5次。
消毒前預處理，將花蕾剪下放入水中，在冰箱4～5℃下保持3～4天。低溫貯藏後，花藥容易發生胚狀組織。接種時把花蕾用解剖刀、鑷子小心剝開，取出花藥，注意去掉花絲，然後散落接種到培養基上，一個10ml的試管可接種20個花藥。
培養條件：培養溫度在23～28℃左右，每天11～16h的光照，光照強度2000～4000lx。
培養曆程：脫分化培養時，可用MS+2.4－D的培養基，或N6+2.4－D的培養基，經10～30天，可誘導生成愈傷組織，或少數生成胚狀體。愈傷組織增殖到1～3mm左右時，應轉移到加有細胞分裂素和微量生長素的新的分化培養基上，再經20～30天，可獲花粉植株。
1.4花藥培養中的花粉發育過程
①營養細胞發育途徑
在花藥離體培養中，花粉第一次有絲分裂形成不均等的營養核和生殖核。生殖核較小，一般不分裂或隻分裂1～2次，就逐步退化。而體積大的營養核經多次分裂且形成了細胞壁，最後變成了多細胞團，迅速生長，很快實破細胞壁，細胞不斷分裂，可以產生胚狀體或愈傷組織。
②生殖細胞發育途徑
在這種途徑下，營養核隻分裂1～2次就退化了，而生殖核經多次分裂發育成多細胞團。
③營養細胞和生殖細胞同時發育的途徑
花粉第一次有絲分裂形成的營養核和生殖核同時進行多次分裂，因此最後形成的多細胞團包括兩部分，一部分細胞較大的是由營養細胞分裂而來；另一部分細胞較小的是由生殖細胞分裂而來。
④花粉均等分裂途徑
花粉進行均等分裂形成兩個均等的子核，以後二核間產生壁，形成兩個子細胞，由兩個子細胞形成多細胞團，迅速生長，穿破藥壁而形成胚狀體或愈傷組織。
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