操作視頻|綠膿菌素測定實驗
用途:用於綠膿杆菌的綠膿菌素測定試驗。
成分(g/L):
檢驗原理: 蛋白腖和甘油提供碳氮源;氯化鎂和硫酸鉀促進綠膿色素和熒光素的產生;瓊脂是培養基的凝固劑。
用法:
Suspend 46.4g of the medium in one liter of purified water containing10g of glycerol. Heat , with frequent agitation, and boil for 1 minute. Autoclave 15 min at 121°C. 稱取本品 46.4g,另稱取 10g甘油,加熱煮沸溶解於1000ml純化水中,分裝 ,121℃高壓滅菌 15 分鍾,備用。
注:培養基中含少量氯化鎂,滅菌後可能出現微量沉澱。
綠膿菌素生成試驗方法及原理:
方法:挑取可疑菌落接種在在綠膿菌素測定用培養基(PDP)斜麵上,培養24小時,觀察斜麵有無色素。如有色素,在試管內加氯仿3.0~5.0mL,充分震搖,使培養物中的綠膿菌素提取在氯仿中,待氯仿提取液呈現綠色時,加1mol/L鹽酸約1mL,震搖後靜置片刻,上層鹽酸溶液中呈現粉紅至紅色實驗結果為陽性,否則為陰性。
原理:銅綠假單胞菌能產生的綠膿菌素能被氯仿提取,且在水中溶解度比氯仿大,並且會發生可逆的氧化還原反應,氧化時堿性呈藍色,酸性呈紅色。所以加入鹽酸溶液並震搖後,綠膿菌素會由氯仿轉移至鹽酸溶液中,並在酸性環境中呈紅色。
綠膿菌素測定用培養基中細菌的生長特征:
綠膿菌素測定(PDP)試驗流程及現象:/asphtml/refere9491.htm
綠膿菌素測定(PDP)試驗操作視頻:/video/lvnongjunsu.asp
綠膿菌素測定用培養基(USP)微生物靈敏度試驗:
按標簽用法製備培養基,接種以下質控菌株,放置36±1℃需氧培養24±2小時。