麥氏比濁法及麥氏比濁管配製

 

在臨床微生物學檢驗中，麥氏比濁法常用於細菌鑒定、藥敏實驗前配置菌液時大致判斷菌液濃度的一種方法，通常認為，如將配菌液濃度配成0.5麥氏比濁管時，相當於1.5×108細菌數/ml，由於方法本身就是一種估計的方法，所以盡管不同細菌大小差異很大，除了真菌孢子，細菌的差別不大，結果不會有影響。但是，標準比濁管的濃度，是藥敏實驗結果的影響因素之一。

 

K-B法藥敏試驗時接種物配製有兩種方法，第一種是肉湯增菌法（對數生長法），是用接環挑取3-5個細菌菌落入肉湯增菌管中進行增菌4-6小時，然後用生理鹽水或肉湯對增菌管中的培養物進行稀釋校正使其濃度達到0.5麥氏比濁標準（因為經過增菌培養其培養物濃度一般都高於此標準）。第二種方法是直接菌落法：從孵育18-24小時的非選擇性培養基上，挑取3-5菌落，直接用肉湯或鹽製成懸液作為接種，然後將濁度調整至0.5麥氏比濁標準。此法是檢測苛養菌（如嗜血杆菌、淋病奈瑟菌和鏈球菌）和潛在的對甲氧西林耐藥的葡萄球菌的推薦方法。

 

0.5麥氏比濁管配製方法：

（1）0.048M BaCL2 (1.17% W/V BaCL2 . 2H2O) 0.5ml

     0.36N H2SO4 (1%, V/V) 99.5ml

 

（2） 將二液混合，按每管4-6mL將硫酸鋇懸液分裝於帶懸蓋的管子中，管子尺寸應與培養或稀釋接種菌所用的管子一致。應密封並貯存於室溫避光處。保存有效期為6個月。

（3） 每次使用前，應將濁度標準管置於旋轉混勻器上劇烈振動，目測其外觀濁度應均勻一致。若有大顆粒出現，此標準管應更換。

 

 

（4） 使用前核實其正確濃度，每個月都應證實或更換。濁度標準的正確濃度應使用分光光度計測定吸光度核實。該分光光度計光徑為1cm，並配有合適的比色杯。0.5號麥氏標準管在625nm處的吸光度值應為0.08-0.10。

（5）  應用時，可目測或使用比濁儀即可。