2、用於無菌操作的器械采用灼燒滅菌
在無菌操作時，把鑷子、剪刀、解剖刀等浸入95%的酒精中，使用之前取出在酒精燈火焰上灼燒滅菌。冷卻後，立即使用。操作中可采用250或500毫升的廣口瓶，放入95%的酒精，以便插入工具。
3、玻璃器皿及耐熱用具采用幹熱滅菌
幹熱滅菌是利用烘箱加熱到160-180℃的溫度來殺死微生物。由於在幹熱條件下，細菌的營養細胞的抗熱性大為提高，接近芽孢的抗熱水平，通常采用170℃持續90分鍾來滅菌。幹熱滅菌的物品要預先洗淨並幹燥，工具等要妥為包紮，以免滅菌後取用時重新汙染。包紮可用耐高溫的塑料。滅菌時應漸進升溫，達到預定溫度後記錄時間。烘箱內放置的物品的數量不宜過多，以免防礙熱對流和穿透，到指定時間斷電後，待充分冷涼，才能打開烘箱，以免因驟冷而使器皿破裂。幹熱滅菌能源消耗太大，浪費時間。
4、不耐熱的物質采用過濾滅菌
一些生長調節劑，如赤黴素、玉米素、脫落酸和某些微生物是不耐熱的，不能用高壓滅菌處理，通常采用過濾滅菌方法。
一些化學成分在高溫高壓下回發生降解而失去效能或降低效能。經高溫滅菌後赤黴素GA3的活性僅及不經高溫滅菌的新鮮溶液的10%。蔗糖經高溫後部分被降解成D-葡萄糖和D-果糖，果糖又可被部分水解，產生抑製培養的植物組織生長的物質。高溫還可使碳水化合物和氨基酸發生反應。IAA，NAA，2，4-D、激動素和玉米素在高溫下是比較穩定的。維生素具有不同程度的熱穩定性，但如果培養基的PH值高於5.5，則維生素B1會被迅速降解。泛酸鈣、植物組織提取物等要過濾滅菌，不能高溫滅菌，否則會失去作用。
防細菌濾膜的網孔的直徑為0.45微米以下，當溶液通過濾液後，細菌的細胞和真菌的孢子等因大於濾膜直徑而被阻，在需要過濾滅菌的液體量大時，常使用抽濾裝置；液量小時，可用注射器。使用前對其高壓滅菌，將濾膜裝在注射器的靠針管處，將待過濾的液體裝入注射器，推壓注射器活塞杆，溶液壓出濾膜，從針管壓出的溶液就是無菌溶液。
過濾除菌操作步驟：首先將過濾器、接液瓶用紙包好，濾膜可放在培養皿內用紙包好。使用前先經121℃高壓蒸汽滅菌30分鍾；在超淨工作台上，將濾器裝置裝好，用滅菌無齒鑷子將濾膜安放在隔板上，濾膜粗糙麵向上；然後將待除菌的液體注入濾器內，開動真空泵即可過濾除菌。濾液經培養證明無菌生長後可保存備用。
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