彎曲菌屬及其檢驗

 

1．彎曲菌屬的主要特點及分類

 

彎曲菌屬(Campylobacter) 是一類呈逗點狀或S形的革蘭陰性杆菌，廣泛分布於動物界，其中有些可引起動物和人類的腹瀉、胃腸炎和腸道外感染。

 

目前彎曲菌屬共有18個菌種和亞種，引起人類疾病的主要是空腸彎曲菌空腸亞種，其次是胎兒彎曲菌和大腸彎曲菌等。

 

2．細菌特性

（1）形態染色 本屬細菌為革蘭陰性無芽孢的彎曲短杆菌，不易染色，菌體彎曲呈S狀或海鷗展翅狀等，一端或兩端各有一根鞭毛，運動活潑，暗視野顯微鏡下呈“投標樣”運動。

 

（2）培養特性 微需氧菌，最適生長環境是含氧氣5％、二氧化碳10％、氮氣85％；孵育溫度通常取決於所需要分離的菌株，在不同的溫度下培養基的選擇性也不同，通常絕大多數實驗室用42℃作為初始分離溫度，這一溫度對空腸彎曲菌、大腸彎曲菌的生長有利，相反其他菌株在37℃生長良好。

 

營養要求高，在普通培養基上不生長，分離彎曲菌常用的選擇性培養基大多含有抗生素（主要為頭孢呱酮），以抑製腸道正常菌群。常用的有含血的Skirrow培養基、頭孢呱酮-萬古黴素-兩性黴素瓊脂培養基（CVA）和不含血的碳-頭孢呱酮-去氧膽酸鹽（CCDA）、碳基選擇性培養基（CSM）和半固體動力培養基等。

 

（3）生化反應 氧化酶和觸酶陽性，可還原硝酸鹽為亞硝酸鹽，不分解和不發酵各種糖類，不分解尿素，具體生化反應見表13－1。

 

（4）抵抗力 本屬細菌的抵抗力弱，對一般消毒劑敏感，但耐寒，在4℃冰箱或水中可存活達4周。

                    表13-1 彎曲菌屬的生化特征

 

注：+，＞90％陽性；-，＜10％陽性；V，可變；ND，未定；W，反應較弱；S，敏感；R，耐藥

3．臨床意義

 

彎曲菌的傳播途徑主要為食物和水，傳播方式多為經口傳播，食用未煮熟的雞、飲用未經處理的水和未經消毒的牛奶均可引起彎曲菌腸炎的發生。本菌具有黏附定居和入侵上皮細胞的能力，通過產生的腸毒素、細胞毒素和內毒素等多種毒力因子致病，病變部位通常在空腸、回腸，也可蔓延至結腸。

 

空腸彎曲菌空腸亞種是彎曲菌中最重要也是最常見的的人體致病菌（占彎曲菌腹瀉的80％～90％），腹瀉是空腸彎曲菌感染最常見的臨床表現。除腸炎外，近年來也出現了空腸彎曲菌繼發關節炎敗血症、腦膜炎和格林巴利綜合征。GBS病人分離到的空腸彎曲菌大都具有特殊的血清型O:19，可與人體的神經組織發生交叉免疫反應而致病。

 

 

 

胎兒彎曲菌主要引起腸道外感染，其中胎兒亞種和貓、綿羊的感染性流產關係密切，較少引起人類感染，感染人體常引起全身症狀。

 

4．微生物學檢驗

 

（1）檢驗程序

 

（2）標本采集 可采集糞便、肛拭子及剩餘食物，標本采集後應立即送檢，或將標本接種於卡-布運送培養基中送檢；對於高燒和患腦膜炎的病人，可於用藥前抽取靜脈血或腦脊液，注入布氏肉湯中送檢。

 

（3）檢驗方法

 

1）顯微鏡檢查 ①懸滴法動力檢查：顯微鏡下觀察有無螺旋狀或投標樣運動，腦脊液標本經離心沉澱後再製成懸滴標本檢查；②染色標本檢查：取新鮮糞便或腦脊液離心沉澱物塗片、革蘭染色，查找革蘭陰性、彎曲呈S狀或螺旋狀杆菌，鞭毛染色見一端或兩端單根鞭毛；

 

2）分離培養 可將標本直接接種於選擇性培養基上，也可將標本過濾後培養，彎曲菌形成的菌落為灰色、扁平、表麵濕潤、圓形凸起、邊緣不規則，常沿穿刺線蔓延生長的菌落，在血平板上不溶血。本屬細菌在布氏肉湯中呈均勻混濁生長。培養時需注意氣體環境和適合的溫度，空腸彎曲菌最適的溫度為42℃～43℃，胎兒彎曲菌在42℃不生長。

 

 

3）鑒定 彎曲菌屬的鑒定比較複雜，必須綜合多種試驗才能確定。通常在彎曲菌選擇培養基上氧化酶陽性、革蘭染色陰性、彎曲呈S形或螺旋形的細菌初步鑒定為彎曲菌，進一步的鑒定試驗有：①馬尿酸鹽水解試驗：本試驗是鑒別空腸彎曲菌空腸亞種和多氏亞種的重要試驗，在彎曲菌選擇性培養基上經42℃孵育，氧化酶陽性、有特征性的彎曲菌形態、輔以馬尿酸鹽試驗陽性即可報告為空腸彎曲菌空腸亞種；②醋酸吲哚水解試驗：本試驗空腸彎曲菌為陽性而胎兒彎曲菌為陰性；③萘啶酸、頭孢噻吩耐藥試驗：空腸彎曲菌和大腸彎曲菌對萘啶酸敏感，對頭孢噻吩耐藥；胎兒彎曲菌對萘啶酸耐藥而對頭孢噻吩敏感。近來出現了對萘啶酸耐藥的空腸彎曲菌和大腸彎曲菌，應結合馬尿酸鹽水解試驗進行鑒定。

 

彎曲菌的其餘鑒定試驗有：不同溫度的生長試驗（25℃、37℃、42℃）、觸酶試驗、硝酸鹽還原試驗、產H2S試驗等（見表13-1）。

 

（4）耐藥性 由於彎曲菌感染大多呈輕症和自限性，一般不需特異性治療。體外試驗顯示，絕大多數彎曲菌對頭孢菌素和青黴素耐藥，環丙沙星治療彎曲菌感染非常有效，但近年來也出現了不少耐藥菌株。空腸彎曲菌通常對紅黴素敏感，其耐藥率小於5％；而80％以上的大腸彎曲菌對紅黴素耐藥。胎兒彎曲菌引起的全身感染可用紅黴素、氨苄西林、氨基糖苷類和氯黴素治療。