一、試驗原理：
用於經防腐劑或消毒劑處理的樣品增菌培養。
胰蛋白腖和葡萄糖為細菌生長提供營養,並中和醇類消毒劑；組氨酸可以中和醛類消毒劑，硫代硫酸鈉可以中和含氯、碘消毒劑和過氧化物消毒劑，大豆卵磷脂和吐溫80組合可以中和，季銨鹽類消毒劑，酚類消毒劑和洗必泰等。
二、培養基配方（g/L）：
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胰蛋白腖 |
20.0 |
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組氨酸鹽酸鹽 |
1.0 |
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硫代硫酸鈉 |
5.0 |
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葡萄糖 |
2.5 |
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大豆卵磷脂 |
30.0 |
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pH 7.2±0.2 25℃ |
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三、試驗方法：
1. 稱取本品58.5g，另取吐溫-80 20g加熱溶解於1000ml蒸餾水中，分裝試管，121℃高壓滅菌15分鍾。
2. 製備質控菌株，使菌液濃度約為1000CFU/ml。
消毒劑中和試驗：
1. 將消毒劑加入9ml中和劑試管中混勻，中和10min。同時將等量消毒劑加入與中和劑培養基相同體積的生理鹽水管中混勻，靜置10min。
2. 取質控菌株1ml，同時接種於中和完畢後的培養基和生理鹽水中，混勻。同時取質控菌株1ml，接種於9ml生理鹽水中，混勻，轉接塗布TSA平皿。空白對照組應將1ml生理鹽水接種於9ml生理鹽水中，混勻，轉接塗布TSA平皿。從加入質控菌株至轉接的過程應在15min內操作完畢。將TSA平皿放置於36±1℃培養18-24小時。
增菌效果試驗：
1.接種10-100CFU的質控菌株加入中和劑培養基中，36±1℃培養18-24小時，觀察試管。
四、結果觀察與解釋
消毒劑中和試驗：轉接塗布TSA平皿後，將TSA平皿36±1℃培養18-24小時，觀察結果。菌株+中和劑+消毒劑組的塗布計數菌數應與菌株+生理鹽水組的塗布計數菌數相近。若菌株+中和劑+消毒劑組塗布計數明顯偏少，則說明培養基不能中和該種類的消毒劑或消毒劑濃度超出了培養基的中和能力，應重新測試。
菌株+生理鹽水+消毒劑組塗布計數結果應與空白對照組一致，若此組有大量細菌生長，則說明此消毒劑對測試菌無殺滅作用或消毒劑已失效，應重新測試。
培養基增菌效果實驗，培養結束後中和劑培養基應明顯渾濁，表明其對測試菌種增菌效果良好。
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