一、基本原理
莢膜是包圍在細菌細胞外麵的一層粘液性物質,其主要成分是多糖類,不易被染色,故常用襯托染色法,即將菌體和背景著色,而把不著色且透明的莢膜襯托出來。莢膜很薄,易變形,因此,製片時一般不用熱固定。
二、器材
圓褐固氮菌(Azotobacter chroococcum);
莢膜染色液,純甲醇等。
三、操作步驟
1.在載玻片一端滴一滴無菌水,取少許培養了72小時的圓褐固氮菌在水滴中製成懸液。取一滴新配好的黑色素溶液(也可用繪圖墨水)與菌懸液混合,另取一塊載玻片作為推片,將推片一端平整的邊緣與菌懸液以30度角接觸後,順勢將菌懸液推向前方,使其成勻薄的一層,風幹。
2.用純甲醇固定1分鍾。
3.加番紅液數滴於塗片上,衝去殘餘甲醇,並染30秒鍾,以細水流適當衝洗,吸幹後油鏡檢查,背景黑色,莢膜無色,細胞紅色。
四、實驗報告
繪圖說明圓褐固氮菌菌體及莢膜的形狀。
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