A、肉毒毒素的檢出
肉毒中毒的診斷，重要的是毒素的檢出及定型；罐頭食品的細菌學檢驗，有時需要證實肉毒梭菌的存在，不過，最終還是要根據產毒試驗來鑒定細菌及其型別。
B、肉毒毒素檢測的主要程序
1.初步的定性試驗----小白鼠腹腔注射法
檢驗樣品經適當處理後取上清夜，用明膠磷酸緩衝液稀釋（1：5、1：10、1：100三個稀釋度）後各取0.5毫升腹腔注射小白鼠；另取上清夜100℃10分鍾加熱後注射小白鼠；另取上清夜經胰酶處理後注射小白鼠；每個注射樣注射二隻小白鼠；注射後，定時觀察小白鼠，連續觀測48小時；排除24小時後死亡的白鼠和無症狀死亡的小白鼠；48小時後，如果除了經熱處理後再注射樣品的小白鼠未死亡，其餘小白鼠均死亡的情況，重複試驗，增加稀釋倍數，計算最底致死量。並進行抗毒素中和試驗。
2.中和試驗
用無菌生理鹽水溶解凍幹的抗毒素，，取A、B、E、F四種抗毒素注射於小白鼠體內；同時取未注射抗毒素的小白鼠做對照；注射抗毒素30分鍾或1小時後，注射不同稀釋度（覆蓋10、100、1000倍最小致死量）的含毒素樣品，觀察48小時，如發現毒素未被中和，再取C、D型抗毒素和A-F多價抗毒素重複上述試驗；如小白鼠死亡，應將含毒素樣品稀釋後再重複以上試驗。
3．試驗的幾個注意事項
3.1典型的肉毒中毒，小白鼠會在4至6小時內死亡，而且98-99%的小白鼠會在12小時內死亡，因此，試驗前24小時內的觀察是非常重要的。
3.2 24小時後的死亡是可疑的，除非有典型的症狀出現。
3.3如果小白鼠注射經1：2或1：5倍數稀釋的樣品後死亡，但注射更高稀釋度的樣品後未死亡，這也是非常可疑的現象，一般為非特異性死亡。
3.4小白鼠要用不會抹去的顏料加以標記。
3.5小白鼠的飼料與水必須及時添加、充分供應。
4.結果分析
4.1食物中發現毒素，表明未經充分的加熱處理，可能引起肉毒中毒。
4.2檢出肉毒梭菌，但未檢出肉毒毒素，不能證明此食物會引起肉毒中毒。
4.3肉毒中毒的診斷必須以檢出食物中的肉毒毒素為準。
4.4中和試驗可以為毒素定型。
C、肉毒梭菌的檢驗與分離鑒定
肉毒梭菌檢驗方法的重點乃是產毒及毒素的檢出試驗，如要證實是否有肉毒梭菌存在，隻要分離、培養、毒素鑒定即可。
1.前增菌
樣品分別接種於皰肉培養基、TPGYT培養基，並分別與35、26℃培養7天。
2.分離
培養7天後，染色、鏡檢，觀察菌的形態是否為典型的肉毒梭菌。取1-2毫升培養物加等量的酒精混合（或80℃加熱10分鍾，）後在室問溫下培養1小時，非蛋白分解型的肉毒梭菌，因其芽胞不耐熱，不要采取熱處理的方法。
用接種環塗劃酒精處理液或熱處理的培養物於小牛肝卵黃瓊脂或厭氧卵黃瓊脂平板上，厭氧培養48小時，35℃。
典型菌落是隆起或扁平，光滑或粗糙，在卵黃培養基上用斜光檢驗時菌落表麵通常出現虹暈色（iridescence）,此光區稱為“珍珠層”，C、D、E型菌通常有2-4毫米黃色沉澱區圍繞，A、B型菌通常顯示較小的沉澱區。
挑取10個典型菌落，分別接種於皰肉培養基、TPGYT培養基，並分別與35、26℃培養7天，再取培養物按照1.2.1、1.2.2的方法進行肉毒毒素的檢測即可。
生化反應試驗，可以為鑒定做參考，以上肉毒梭菌的培養、分離、鑒定試驗力求迅速，不要長時間接觸空氣，最好在厭氧條件下操作。
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