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培養基的檢驗與驗收(八)鑒定類培養基的製備方法


鑒定類培養基的介紹

  鑒定類培養基一般用於檢驗微生物一項或多項生化特性,許多分離類的培養基同時也具有鑒定效果,也被稱為分離鑒別培養基。
  鑒定培養基按狀態可分為液體、固體、半固體,使用時配製的方法也不相同。
配製方法
1、液體類鑒定培養基:
  按照標簽說明進行稱量,之後不停攪拌均勻,直至完全溶解至無顆粒狀,然後用移液槍分裝於試管中,包紮好後拿去滅菌。
  需要觀察產氣的,例如硝酸鹽腖水培養基,需要在試管中放入倒管,滅菌後要進行排氣;
  需厭氧的,例如甘露醇發酵培養基,可在培養基上方覆蓋約3mm厚的液體石蠟。
2.半固體類培養基:
  此類培養基中通常含有少量的瓊脂,稱量並攪拌至無顆粒後,需先加熱煮沸溶解均勻,再用移液管分裝於試管中,包紮好拿去滅菌
  滅菌後擺直立,待凝固後備用
3.固體類培養基:
  此類培養基中因含有瓊脂,在滅菌前也需要進行加熱煮沸,配製方式一般有倒平板、擺直立、擺長斜麵和高層斜麵這四種方式。
  ①倒平板
  按照配製方法,將滅菌後冷卻至50℃左右的完全培養基傾入無菌平皿即可,需要觀察透明圈等現象的培養基,例如酪蛋白瓊脂、血平板等
  傾注平板不宜過厚。
  ②擺長斜麵
  對於需要觀察需氧條件下的單項生化反應的培養基,如尿素酶瓊脂、西蒙氏檸檬酸鹽瓊脂等,滅菌後一般擺成長斜麵(斜麵:底層≈3:2,底層也可以更短,主要起固定作用)。
  ③擺高層斜麵
  對於需要同時觀察有氧和缺氧部分生化反應結果的培養基,如三糖鐵瓊脂、克氏雙糖鐵瓊脂等,滅菌後需擺高層斜麵(斜麵:底層≈2:3),注意:試管塞必須具有良好的透氣性。

配製小貼士:滅菌和分裝的順序
  可完全滅菌的培養基,通常建議先加熱溶解分裝,再進行滅菌處理。對於滅菌後還需添加不穩定成分的培養基,則需先滅菌,冷卻後加入不穩定成分,再分裝至無菌器皿。
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