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海水中發光菌的分離培養


在夜晚的海邊,有時可見到海水或漂浮的魚蝦發光現象,這是由於海水中一些發光菌大量繁殖引起的。常見的發光細菌有明亮發光杆菌、費氏弧菌、哈維氏弧菌等。今天我們一起來分離一下海水中的發光菌。
首先,在觀察到海水發光現象時,可對海水進行取樣,加入至2216E液體培養基中,20-25℃增菌培養基24-48h,在黑暗中觀察培養基是否有發光現象。若能觀察到培養基發光,說明有發光菌生長,挑取培養後的2216E液體培養基劃線轉接至發光菌培養基平板,20-25℃培養24-48h,在黑暗處觀察是否有發光的菌落。挑取發光的單菌落轉接至另一平板進行分離純化,即得到了發光菌。也可采用發光的魚蝦屍體加入至無菌生理鹽水中製成樣液,直接塗布至發光菌培養基,20-25℃培養24-48h,在黑暗中觀察是否有發光的菌落,再挑取發光的單菌落轉接到另一平板進行分離純化。
注:大多數發光菌的酶促反應需要氧氣參與,並要在25℃以下進行,當培養溫度超過30℃時會導致發光反應相關的酶活力大幅度下降,細菌則會微弱發光或不發光。

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