改良克氏雙糖鐵培養基中含有少量的葡萄糖和大量的山梨醇，常用於小腸結腸炎耶爾森氏菌的檢驗。
首先，用接種針挑取試驗菌苔，“之”字劃線接種於改良克氏雙糖鐵培養基斜麵處，之後底層穿刺，穿刺約培養基1/2深度。
本試驗以鼠傷寒沙門氏菌、普通變形杆菌、小腸結腸炎耶爾森氏菌、福氏誌賀氏菌為例進行試驗。之後放置於25℃需氧培養24小時。

實驗現象及原理解釋：
培養結束後取出試管觀察，發現接種鼠傷寒沙門氏菌、小腸結腸炎耶爾森氏菌的試管斜麵及底層均為黃色，這是因為這兩種細菌能發酵葡萄糖及山梨醇，產生大量酸，pH下降培養基變黃；
普通變形杆菌和福氏誌賀氏菌斜麵紅色底層黃色是由於細菌僅能發酵葡萄糖，產生少量酸，斜麵處的酸受空氣氧化成堿性物質使pH較高顯紅色，底層酸不被氧化顯黃色；
接種鼠傷寒沙門氏菌和普通變形杆菌的試管有氣泡產生且變黑，是由於產硫化氫細菌可還原硫代硫酸鈉、硫酸亞鐵生成硫化氫，與培養基中亞鐵離子反應生成黑色的硫化亞鐵。