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一、複發酵
首先將複發酵試驗中，渾濁產氣的LST肉湯管逐一編號① ②......
再取兩支EC肉湯管，與LST管對應編號① ②......並設置一支空白對照。
注意：若小倒管內有氣體，則需先將倒管內的氣體排出，再進行接種操作。
之後將LST管振蕩混勻，用無菌接種環，分別從每個LST管中取一環菌液，接入對應編號的EC肉湯管中；每換1管，需將接種環灼燒，保證無菌。
接種完畢後將培養箱溫度設置為44.5℃，將其放置於培養箱中，培養24-48h。
培養結束後，挑選渾濁產氣的EC肉湯管，進行後續的分離操作。
二、分離操作
將渾濁產氣的EC肉湯管混勻，取一環菌液，劃線至EMB平板（每個EMB平板編號與EC肉湯管編號對應）；同時劃線標準陽性菌大腸埃埃希氏菌，同步培養作為對照。36℃培養18-24h。
三、結果觀察
EMB平板上長出的黑色、有金屬光澤的菌落，即為可疑的大腸埃希氏菌。後續可挑取這類菌落進一步純化、鑒定，以確認是否為大腸埃希氏菌。