什麽是蛋白質毒素結晶試驗：
在GB4789.14標準中，在進行蠟樣芽胞杆菌鑒定時蠟樣芽胞杆菌與蘇雲金芽孢杆菌生化反應相同，但蘇雲金芽孢杆菌在形成芽孢的同時，會在芽孢旁形成一顆菱形、方形或不規則形的堿溶性蛋白質晶體，稱為伴孢晶體，該晶體易被堿性染料著色，因此常用0.5%堿性複紅染料進行染色觀察。而蠟樣芽胞杆菌和其他芽孢杆菌不產生伴孢晶體。這個染色實驗就是蛋白質毒素結晶試驗。

操作步驟：

培養芽孢：將待測菌株接種至硫酸錳營養瓊脂平板，30±1℃培養24±2h，並於室溫放置3-4天。若芽孢產生不豐富，可在室溫繼續放置2-3天後觀察。
原理：芽孢杆菌在營養條件缺乏時，開始形成芽孢，因此在進行細菌產芽孢相關試驗時，通常需進行5-7天的放置或培養，待培養基內營養耗盡，可獲得更豐富的芽孢。
製片染色：挑取培養物少許於載玻片上，滴加蒸餾水混勻並塗成薄膜。經自然幹燥，微火固定後，加甲醇作用 30 s 後傾去，再通過火焰幹燥，於載玻片上滴滿 0.5%堿性複紅，放火焰上加熱（微見蒸氣，勿使染液沸騰)持續 1 min～2 min，移去火焰，再更換染色液再次加溫染色 30 s，傾去染液用潔淨自來水徹底清洗、晾幹後鏡檢。觀察有無遊離芽胞（淺紅色）和染成深紅色的菱形蛋白結晶體。
（注：在菌苔生長密集的地方營養消耗更快，更容易產生芽孢，因此挑取密集生長處的菌苔製片易觀察到更多芽孢）