CIN-1培養基基礎

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小腸結腸炎耶爾森氏菌（Yersinia enterocolitica），簡稱小腸耶爾森氏菌，是革蘭氏陰性杆菌或球杆菌。本菌不形成芽胞，無莢膜，有鞭毛；但其鞭毛在30℃以下培養條件形成，溫度較高時即喪失，因此表現為30℃以下有動力，而35℃以上則無動力。該菌是能在冷藏溫度下生長的少數幾種腸道致病菌之一，在4℃條件下能保存和繁殖。
1. 分離：用接種環取乳與乳製品增菌液或經過堿處理的其他食品增菌液分別劃線接種於CIN-1瓊脂平板和改良Y瓊脂平板，26℃±1℃培養48 h±2 h。典型菌落在CIN-1上為深紅色中心，周圍具有無色透明圈（紅色牛眼狀菌落），菌落大小為1 mm~2 mm，在改良Y瓊脂平板上為粉紅色透明、不黏稠的菌落。
2. 改良克氏雙糖試驗：分別從選擇性平板挑取可疑菌落3個~5個，接種於改良克氏雙糖鐵瓊脂，先在斜麵劃線，再於底層穿刺，26℃±1℃培養24 h，選擇斜麵和底部皆變黃且不產氣的培養物做進一步的生化鑒定。
3. 尿素酶試驗和動力觀察：用接種環挑取一滿環可疑培養物，接種到尿素培養基中，接種量應足夠大，振搖幾秒鍾，26℃±1℃培養2 h~4 h。將尿素酶試驗陽性菌落分別接種於兩管半固體培養基中，於26℃±1℃和36℃±1℃培養24 h。將在26 ℃有動力而36℃無動力的可疑菌培養物劃線接種營養瓊脂平板，進行純化培養，用純化物進行後續的鑒定。
4. 革蘭氏染色鏡檢 ：將純化的可疑菌進行革蘭氏染色。小腸結腸炎耶爾森氏菌呈革蘭氏陰性球杆菌，有時呈橢圓或杆狀，大小為（0.8 μm~3.0 μm）×0.8 μm。
5. 生化鑒定：打開V-P生化管，用接種針從純化平板上挑取單個菌落接種至生化管中，相同方法接種其他生化管，氨基酸生化管需要加入100 μL無菌石蠟覆蓋，放置於26℃±1℃培養。 小腸結腸炎耶爾森氏菌的主要生化特征：V-P試驗陽性，鳥氨酸脫羧酶+，蔗糖+（有不同的生化型），棉子糖-，山梨醇+，甘露醇+，鼠李糖-。