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肺炎支原體的靈敏度試驗方法


肺炎支原體的靈敏度試驗采用支原體肉湯培養基進行培養,主要的步驟包括:實驗物品準備及滅菌,添加血清,調節培養基pH,接種肺炎支原體。本視頻詳細講解了實驗的具體過程以及如何有效避免汙染的操作方法,希望對您有所幫助。
1.培養基的配製及物品的準備:將陶瓷缸、試管使用蒸餾水衝洗幹淨備用,配製betway必威西汉姆联支原體肉湯培養基於陶瓷缸中溶解完全,分裝試管,每管8 mL,塞上膠塞。之後將培養基、碳酸鈉溶液、移液槍頭包好,於121℃滅菌鍋中滅菌15分鍾。
2.燒試管口:滅菌結束後,待培養基冷卻至室溫後,對每支試管灼燒管口,將管口水分烤幹,可有效防止汙染,膠塞也需過火。此後操作過程中,隻要試管進行了震蕩操作,特別是震蕩過程中有液體接觸到試管口處的膠塞,均需再次燒口。
3.添加血清:向每支試管中添加2 mL的血清,震蕩均勻。
4.調節pH:取三支試管使用碳酸鈉調節pH至7.4~7.8,本次確定碳酸鈉平均添加量為0 μL。因此無需添加碳酸鈉即可進行下一步操作(注意:均使用滅菌後的碳酸鈉以避免誤差)。
5.接種肺炎支原體:接種肺炎支原體於培養基中混合均勻記為-1,並做梯度稀釋至-9,設兩支未接種的培養基為陰性對照管。使用封口膜封口,之後放置於36℃±1℃的培養箱中培養7-14天。
6.結果觀察:培養第9天,靈敏度為9。

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